如何減少血清沉淀物的產(chǎn)生?
公司以*產(chǎn)品為標(biāo)準(zhǔn),自主研究開發(fā)了一系列應(yīng)用于分子生物學(xué)、蛋白質(zhì)學(xué)、免疫學(xué)研究的相關(guān)產(chǎn)品,全面完善了生產(chǎn)流程和產(chǎn)品質(zhì)量控制體系,同時(shí)利用自身的優(yōu)勢(shì)不斷整合國(guó)內(nèi)外資源,逐步擴(kuò)大產(chǎn)品種類和范圍,代理了美國(guó)R&D、RB、BD、GBD、DSL、BIOO等品牌的ELISA試劑盒,力爭(zhēng)成為生物技術(shù)和食品安全檢測(cè)領(lǐng)域zui的產(chǎn)品供應(yīng)商
我們建議您在使用血清的時(shí)候,注意下列的操作:·解凍血清時(shí),請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。·解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生·請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。·血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,則毋須做此步驟。·若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高,時(shí)間過久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。
提醒你注意一下,細(xì)胞復(fù)蘇是速度一定要快,尤其是在-5℃~0℃這階段,因?yàn)樵谶@個(gè)溫度階段細(xì)胞zui容易受損,如果復(fù)蘇的步驟正確,細(xì)胞仍然仍然可以生長(zhǎng),細(xì)胞活性損失也不是太大。細(xì)胞復(fù)蘇的步驟是:一、準(zhǔn)備一個(gè)1,000ml的燒杯,放入大概三分之二的37℃的溫水。二、從液氮中取出凍存管,迅速放入溫水中震蕩,盡可能在短時(shí)間內(nèi)使其中的物質(zhì)融化。三、將凍存管中的細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管中,然后在1,000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘,棄去上清液。四、在細(xì)胞培養(yǎng)瓶中加入培養(yǎng)液,然后把細(xì)胞放入培養(yǎng)瓶中,放入37℃溫箱中培養(yǎng)。經(jīng)過以上步驟,如果沒有什么特殊情況細(xì)胞是可以生長(zhǎng)的。
可以參考有關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)方面的書籍,里面有很多的經(jīng)典方法.我個(gè)人的經(jīng)驗(yàn)是凍存時(shí)細(xì)胞密度大概要求5x106/ml以上,如果細(xì)胞凍存時(shí)間只要求半年到一年而已,我建議你用-80度的冰箱即可,以免時(shí)不時(shí)需補(bǔ)充氮?dú)猓砑?xì)胞復(fù)蘇時(shí)一般書籍推薦用37℃的水浴箱,我用的大概是40℃,因?yàn)榇蜷_蓋子時(shí)溫度即降,此時(shí)能使凍存細(xì)胞更好的在半分鐘至一分中內(nèi)解凍。將含凍存液的細(xì)胞移至離心管,加入4倍的培養(yǎng)基,500轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘,棄上清。用培養(yǎng)基調(diào)細(xì)胞密度,接種至培養(yǎng)瓶或所需的培養(yǎng)板中培養(yǎng).
公司以*產(chǎn)品為標(biāo)準(zhǔn),自主研究開發(fā)了一系列應(yīng)用于分子生物學(xué)、蛋白質(zhì)學(xué)、免疫學(xué)研究的相關(guān)產(chǎn)品,全面完善了生產(chǎn)流程和產(chǎn)品質(zhì)量控制體系,同時(shí)利用自身的優(yōu)勢(shì)不斷整合國(guó)內(nèi)外資源,逐步擴(kuò)大產(chǎn)品種類和范圍,代理了美國(guó)R&D、RB、BD、GBD、DSL、BIOO等品牌的ELISA試劑盒,力爭(zhēng)成為生物技術(shù)和食品安全檢測(cè)領(lǐng)域zui的產(chǎn)品供應(yīng)商
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提醒你注意一下,細(xì)胞復(fù)蘇是速度一定要快,尤其是在-5℃~0℃這階段,因?yàn)樵谶@個(gè)溫度階段細(xì)胞zui容易受損,如果復(fù)蘇的步驟正確,細(xì)胞仍然仍然可以生長(zhǎng),細(xì)胞活性損失也不是太大。細(xì)胞復(fù)蘇的步驟是:一、準(zhǔn)備一個(gè)1,000ml的燒杯,放入大概三分之二的37℃的溫水。二、從液氮中取出凍存管,迅速放入溫水中震蕩,盡可能在短時(shí)間內(nèi)使其中的物質(zhì)融化。三、將凍存管中的細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管中,然后在1,000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘,棄去上清液。四、在細(xì)胞培養(yǎng)瓶中加入培養(yǎng)液,然后把細(xì)胞放入培養(yǎng)瓶中,放入37℃溫箱中培養(yǎng)。經(jīng)過以上步驟,如果沒有什么特殊情況細(xì)胞是可以生長(zhǎng)的。
可以參考有關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)方面的書籍,里面有很多的經(jīng)典方法.我個(gè)人的經(jīng)驗(yàn)是凍存時(shí)細(xì)胞密度大概要求5x106/ml以上,如果細(xì)胞凍存時(shí)間只要求半年到一年而已,我建議你用-80度的冰箱即可,以免時(shí)不時(shí)需補(bǔ)充氮?dú)猓砑?xì)胞復(fù)蘇時(shí)一般書籍推薦用37℃的水浴箱,我用的大概是40℃,因?yàn)榇蜷_蓋子時(shí)溫度即降,此時(shí)能使凍存細(xì)胞更好的在半分鐘至一分中內(nèi)解凍。將含凍存液的細(xì)胞移至離心管,加入4倍的培養(yǎng)基,500轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘,棄上清。用培養(yǎng)基調(diào)細(xì)胞密度,接種至培養(yǎng)瓶或所需的培養(yǎng)板中培養(yǎng).
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