動物血清的有關(guān)內(nèi)容
隨著熒光定量PCR技術(shù)的成熟和熒光定量PCR儀的普及,用傳統(tǒng)的半定量方法檢測目的基因表達量的升高或者降低,已經(jīng)遠遠不能滿足當(dāng)前科研的需要,針對當(dāng)前研究的熱點基因,閃晶生物及時地從美國biosuper公司引進不同物種、不同基因的熒光定量PCR檢測試劑盒。該試劑盒包含了目的基因和內(nèi)參基因的引物、taqman探針(熒光探針)、反轉(zhuǎn)錄試劑、熒光定量PCR試劑、操作說明書等,用戶只需將提好的RNA加入就可以進行熒光定量PCR實驗,操作方便簡單、適合多種熒光定量PCR儀,同時也避免了自己設(shè)計、合成引物探針的煩惱。目前主要是人、大鼠、小鼠的大部分基因,其它物種的基因需來電或來信咨詢。
動物給藥及采血方案的設(shè)計
給藥劑量與次數(shù) A已知臨床用藥劑量 給藥劑量=臨床人用劑量×動物等效劑量系 數(shù)×在體外實驗體系內(nèi)的稀釋度。 B已知動物藥效學(xué)實驗的有效劑量 給藥劑量=動物藥效學(xué)實驗有效劑量×動物 等效劑量換算系數(shù)(更換動物時)×在體外 實驗體系內(nèi)的稀釋度。
動物給藥及采血方案的設(shè)計
例如某中藥臨床人用劑量為10g/日,體重 按50kg計算,則臨床人用為0.2g/kg;血清供體動物選擇大鼠,其等效劑量系數(shù)粗略 的按照5來計算,在體外實驗體系中添加含藥血清的量按照20%進行(稀釋倍數(shù)為5), 代入上式計算得到: 供體動物給藥劑量=0.2×5×5=5g/kg
動物給藥及采血方案的設(shè)計
給藥次數(shù) 在大多數(shù)情況下,多次給藥優(yōu)于單次給藥。 多次給藥優(yōu)于單次給藥具有一定的理論依據(jù),它的 理論取決于以下兩個因素: 其一、是藥物有無蓄積作用,文獻資料表明,大多 數(shù)藥物具有一定的蓄積性的; 其二、是多次給藥后,是否會在藥物的作用下機體 產(chǎn)生自體活性物質(zhì),比如激素或免疫活性物質(zhì),以 及這些活性物質(zhì)在該藥效學(xué)實驗中作用的大小。
動物給藥及采血方案的設(shè)計
給藥次數(shù)大多為每日1次,連續(xù)3至7天,但 也可以參照血清藥理學(xué)實驗通法,每日給藥 2次(間隔12小時),連續(xù)給藥3天。 另外,需要注意的是為了便于藥物吸收,有 人主張采血前的zui后一次給藥動物應(yīng)予以禁 食,禁食時間一般認為以12 ~ 16小時為宜。
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