手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號(hào)：chem17
掃碼關(guān)注視頻號(hào)
染液制備：傳代細(xì)胞
1. 稱取0.5g吉姆薩粉和22ml甘油；
2. 取少量甘油與吉姆薩粉在研缽內(nèi)充分混合，研磨至無顆粒；
3. 將剩余的甘油倒入研缽，于56℃保溫2h；
4. 加入33ml純甲醇混勻，即為吉姆薩母液，將其保存于棕色試劑瓶內(nèi)；
5. 取9份pH6.80—7.38的Sorensen緩沖液和1份吉姆薩母液混合即得染色液。
貼壁細(xì)胞染色步驟：
1. 去除培養(yǎng)器皿內(nèi)的培養(yǎng)液，用平衡鹽溶液反復(fù)漂洗單層培養(yǎng)物2次；
2. 加入平衡鹽溶液，再逐滴加入等體積甲醇，邊加邊混合，靜置10min；
3. 將50%甲醇-BSS混合液丟棄，加入新鮮的甲醇液浸泡固定細(xì)胞10min，然后用甲醇漂洗細(xì)胞1次；
4. 將瓶內(nèi)細(xì)胞干燥后儲(chǔ)存或直接染色；
5. 按2ml/cm2 的比例滴加吉姆薩染液，覆蓋細(xì)胞層，染色2min；
6. 移除染液，用自來水沖洗掉粉紅色背景后，再用去離子水沖洗細(xì)胞；
7. 用顯微鏡觀察單層潮濕細(xì)胞。若細(xì)胞已干，可重新使細(xì)胞潮濕后再觀察。
結(jié)果：傳代細(xì)胞
細(xì)胞核被染成紫紅色或紫藍(lán)色，而細(xì)胞質(zhì)則被染成淺紅色。
吉姆薩染色法注意事項(xiàng)：
1. 染液宜現(xiàn)用現(xiàn)配，舊染液染色效果不佳。染液保存時(shí)間不宜超過48h；
2. 吉姆薩對(duì)pH極敏感，因此，緩沖液pH要準(zhǔn)確，否則染色效果不佳。如用染色缸染色時(shí)，隨染色時(shí)間的延長，在染液表面常形成一層氧化膜（發(fā)亮）易附著在玻片上形成污穢，且不易除掉。因此在用染色缸染色，尤其用的不是現(xiàn)配者時(shí)，染色前應(yīng)先用小片濾紙刮除液面的氧化層再進(jìn)行染色。染色完畢，應(yīng)把標(biāo)本浸入水中漂洗染液。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購中心