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分析磷酸化蛋白的新方法

來源:上海勁馬實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司   2012年08月28日 09:30  

Phos-tag™zui初由日本廣島大學(xué)醫(yī)藥分子功能科學(xué)研究室開發(fā),后由Wako公司商業(yè)化。Phos-tag™是一種能與磷酸離子特異性結(jié)合的功能性分子。在中性pH(生理性pH)條件下,它可與陰離子取代基結(jié)合,特別是與二價的磷酸單酯陰離子結(jié)合

蛋白磷酸化是重要的翻譯后修飾,在調(diào)控基因表達(dá)和細(xì)胞功能方面起著關(guān)鍵作用。檢測磷酸化時一般使用磷酸化抗體。近幾年,市場上也出現(xiàn)了一些新的技術(shù)和產(chǎn)品,可實(shí)現(xiàn)磷酸化的靈敏檢測。

Phos-tag™技術(shù)便利用了這一特點(diǎn),取代傳統(tǒng)的酶免疫法和放射性同位素法,用來捕捉帶有陰性取代基,特別是二價磷酸單酯陰離子的物質(zhì),改善了以往磷酸化檢測結(jié)果不是特別穩(wěn)定的缺點(diǎn),是迄今為止檢測磷酸化合物比較穩(wěn)定的技術(shù)。

目前,Phos-tag™產(chǎn)品主要分為四大類,可用于磷酸化蛋白的分離(Phos-tag™ Acrylamide)、Western Blot檢測(Phos-tag™ Biotin)、蛋白純化(Phos-tag™ Agarose)及質(zhì)譜分析MALDI-TOF/MS(Phos-tag™ Mass Analytical Kit)。
磷酸化蛋白的檢測生物通

Phos-tag™ Biotin是與生物素結(jié)合的Phos-tag™,可代替western blot檢測中的磷酸化抗體。Phos-tag™ Biotin BTL-104和BTL-105可靈敏檢測PVDF膜上的磷酸化蛋白。

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