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二元高壓梯度系統(tǒng)是一種高效、精準的分離分析技術(shù)，廣泛應(yīng)用于多個領(lǐng)域。通過正確使用該系統(tǒng)，可以顯著提高分析的準確性和可靠性，為科研工作者提供強有力的支持。以下是二元高壓梯度系統(tǒng)的使用細節(jié)：
1. 系統(tǒng)組成與連接：
- 高壓泵：通常有兩個獨立工作的高壓泵，分別用于輸送不同的溶劑。高壓泵采用雙柱塞桿串聯(lián)設(shè)計、凸輪驅(qū)動、懸浮式柱塞導(dǎo)向及數(shù)字脈動阻尼器等，確保輸液脈動小、運行平穩(wěn)，進口高質(zhì)量柱塞桿和密封圈提高了其穩(wěn)定性和耐用性。
- 梯度混合器：位于兩個高壓泵之后，根據(jù)預(yù)設(shè)的梯度程序，自動調(diào)整兩種流動相的比例，實現(xiàn)流動相組成的連續(xù)變化。其精確控制能保證梯度的精度和重現(xiàn)性。
- 色譜柱：內(nèi)填充有特定的固定相，與流動相中的樣品組分發(fā)生相互作用，使不同組分因相互作用力不同而在色譜柱中的移動速度產(chǎn)生差異，從而實現(xiàn)分離。
- 檢測器：如UV紫外檢測器，用于檢測分離后的組分，提供準確的分析結(jié)果。
- 工作站：控制整個系統(tǒng)的運行，包括泵、檢測器、柱溫箱等，具有強大的數(shù)據(jù)處理功能，可輕松實現(xiàn)泵及檢測器的控制、靈活的報告輸出模式，滿足用戶多角度的使用需求。
2. 操作步驟：
- 開機準備：依次打開計算機、二元高壓梯度系統(tǒng)的電源，等待系統(tǒng)初始化完成。同時檢查溶劑托盤內(nèi)的溶劑是否充足，各連接管路是否緊密無泄漏。
- 設(shè)定參數(shù)：在工作站軟件上設(shè)置所需的流動相比例、流量、梯度程序、柱溫、檢測波長等參數(shù)。例如，根據(jù)待分離樣品的性質(zhì)和分析要求，確定初始流動相比例、梯度變化的時間范圍和斜率等。
- 排氣操作：打開排液閥，以較低的流速排出系統(tǒng)中的空氣，防止空氣對分析結(jié)果產(chǎn)生影響。待氣泡排除后，關(guān)閉排液閥。
- 平衡系統(tǒng)：以設(shè)定的初始流動相比例沖洗系統(tǒng)一段時間，使色譜柱達到平衡狀態(tài)。這一步驟對于獲得穩(wěn)定的基線和準確的分析結(jié)果至關(guān)重要。
- 進樣分析：將待測樣品通過進樣口注入系統(tǒng)，開始進行分析。在分析過程中，密切觀察工作站軟件上的色譜圖和相關(guān)數(shù)據(jù)，確保分析過程正常進行。
- 清洗維護：分析完成后，用適當(dāng)?shù)娜軇┣逑聪到y(tǒng)，去除殘留的樣品和流動相，防止污染系統(tǒng)和影響下一次分析。定期對系統(tǒng)進行維護和保養(yǎng)，如更換密封圈、清洗過濾器、校準檢測器等，以保證系統(tǒng)的性能和穩(wěn)定性。
3. 注意事項：
- 溶劑選擇：根據(jù)樣品的性質(zhì)和分析目的選擇合適的流動相溶劑，確保溶劑的純度和兼容性。同時要注意溶劑的毒性和揮發(fā)性，避免對操作人員和環(huán)境造成危害。
- 壓力監(jiān)控：在系統(tǒng)運行過程中，實時監(jiān)控壓力變化。如果壓力異常升高或波動較大，可能是由于管路堵塞、柱塞桿故障等原因引起的，應(yīng)立即停止運行，檢查并排除故障。
- 溫度控制：保持柱溫的穩(wěn)定對于獲得良好的分離效果很重要。柱溫的變化會影響樣品在色譜柱上的保留時間和分離效率，因此要確保柱溫箱的溫度控制準確可靠。
- 梯度精度：二元高壓梯度系統(tǒng)的梯度精度對于復(fù)雜樣品的分離至關(guān)重要。在使用前應(yīng)對系統(tǒng)進行梯度校準，確保實際的梯度比例與設(shè)定值相符。在分析過程中，避免突然改變梯度條件，以免影響分離效果。
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