一、細(xì)胞活力檢測CCK8法實驗步驟
1.取生長狀態(tài)良好的細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞密度,按每孔100 μL細(xì)胞懸液接種于96孔板中,同時設(shè)空白孔(不加細(xì)胞但是加入同體積的培養(yǎng)基)。
注:通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100 μL約含2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100 μL約含5000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。
2.根據(jù)實驗設(shè)計對細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)和處理。
3.每孔加入10 μL的CCK-8溶液。繼續(xù)孵育1~4 h。
注:CCK-8孵育條件與細(xì)胞培養(yǎng)條件相同。
4. 用酶標(biāo)儀測定在450 nm處的吸光度。
二、細(xì)胞活力檢測CCK8法結(jié)果計算
細(xì)胞存活率(%)
=(ODsample?ODblank)/(ODcontrol?ODblank)×100%
抑制率(%)
=(ODcontrol?ODsample)/(ODcontrol?ODblank)×100%
[注]: ODsample:實驗孔的OD值
ODcontrol:對照孔的 OD 值
ODblank:空白孔的OD值
三、產(chǎn)品推薦
Elabscience增強型細(xì)胞活力檢測試劑盒(CCK-8)(E-CK-A362)
產(chǎn)品英文名稱:Enhanced Cell Counting Kit 8 (WST-8/CCK8)
貨號:E-CK-A362
規(guī)格:500Tests、100Tests、500Tests×20
檢測原理:WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),在電子載體存在的情況下,WST-8被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成水溶性的橙黃色formazan,生成的formazan的量與活細(xì)胞數(shù)量成正比,通過檢測在450 nm處的吸光度,可以間接計算活細(xì)胞的量。
檢測方法:比色法
樣本類型:細(xì)胞
檢測儀器:酶標(biāo)儀
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