分子診斷實(shí)驗(yàn)室作為科學(xué)研究和臨床診斷的重要場(chǎng)所,其結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)室的聲譽(yù)和信譽(yù)。然而,核酸污染是分子診斷實(shí)驗(yàn)室中的一個(gè)常見問題,它可以來(lái)自實(shí)驗(yàn)室環(huán)境、實(shí)驗(yàn)人員、試劑耗材或?qū)嶒?yàn)操作等多個(gè)方面。如果樣品被污染,后續(xù)的核酸擴(kuò)增(如PCR)或測(cè)序等實(shí)驗(yàn)結(jié)果就會(huì)受到嚴(yán)重影響,可能導(dǎo)致假陽(yáng)性或假陰性的結(jié)果,從而誤導(dǎo)科學(xué)研究和臨床診斷。因此,祛除分子診斷實(shí)驗(yàn)室中的核酸污染至關(guān)重要。
一、預(yù)防核酸污染的措施
嚴(yán)格分區(qū)與器材專用:
將實(shí)驗(yàn)室劃分為不同的功能區(qū)域,如試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、PCR擴(kuò)增區(qū)及分析區(qū)等,并確保各區(qū)域之間有足夠的隔離。
實(shí)驗(yàn)器材應(yīng)專用,避免交叉使用,以減少污染風(fēng)險(xiǎn)。
規(guī)范實(shí)驗(yàn)操作:
實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)嚴(yán)格遵守操作規(guī)程,佩戴手套、口罩等防護(hù)用品,避免將自身攜帶的核酸帶入實(shí)驗(yàn)體系。
在操作過程中應(yīng)注意避免反應(yīng)液飛濺、氣溶膠產(chǎn)生等可能導(dǎo)致污染的行為。
試劑與耗材的無(wú)核酸處理:
確保實(shí)驗(yàn)中使用的試劑和耗材經(jīng)過嚴(yán)格的無(wú)核酸處理。
對(duì)于商業(yè)試劑,應(yīng)選擇經(jīng)過認(rèn)證的、無(wú)核酸污染的產(chǎn)品。
對(duì)于實(shí)驗(yàn)耗材,如塑料管、移液器頭等,應(yīng)在使用前進(jìn)行清潔和消毒。
設(shè)立對(duì)照實(shí)驗(yàn):
每次實(shí)驗(yàn)務(wù)必設(shè)立陰陽(yáng)性對(duì)照,以驗(yàn)證PCR反應(yīng)的可靠性和擴(kuò)增系統(tǒng)的可信性。
通過設(shè)立對(duì)照實(shí)驗(yàn),可以及時(shí)發(fā)現(xiàn)并排除可能的污染因素。
二、祛除核酸污染的方法
紫外線照射:
紫外線照射可以殺滅空氣中的微生物和核酸分子。
實(shí)驗(yàn)室每次檢測(cè)完畢后,可以使用房間固定和/或可移動(dòng)紫外燈進(jìn)行紫外照射2小時(shí)以上。
但需要注意,紫外線穿透能力較差,對(duì)于邊角和細(xì)節(jié)處可能無(wú)能為力,且只對(duì)核酸大片段有效。
消毒劑處理:
使用核酸污染祛除試劑PCR Clean對(duì)臺(tái)面、地面等進(jìn)行清潔消毒。
每天實(shí)驗(yàn)后,應(yīng)對(duì)工作臺(tái)面、移液器、試管架等設(shè)備進(jìn)行清潔消毒。
其他方法:
酶解法雖然可以降解核酸污染物,但生物酶殘留可能對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成干擾。
酸堿法、次氯酸鈉及過氧化氫處理等方法對(duì)人體皮膚、眼部及呼吸道黏膜刺激性較大,有較強(qiáng)的腐蝕性。
三、維護(hù)實(shí)驗(yàn)室清潔的重要性
確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性:
祛除核酸污染可以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性,為科學(xué)研究和臨床診斷提供堅(jiān)實(shí)的技術(shù)支持。
保護(hù)實(shí)驗(yàn)人員和實(shí)驗(yàn)室安全:
核酸污染不僅影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,還可能對(duì)實(shí)驗(yàn)人員的健康構(gòu)成威脅。
保持實(shí)驗(yàn)室的清潔和無(wú)菌是保護(hù)實(shí)驗(yàn)人員安全的重要措施。
維護(hù)實(shí)驗(yàn)室的聲譽(yù)和信譽(yù):
如果因?yàn)楹怂嵛廴径鴮?dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)確,會(huì)影響實(shí)驗(yàn)室的科研產(chǎn)出和臨床應(yīng)用價(jià)值。
定期進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室清潔和消毒工作,可以維護(hù)實(shí)驗(yàn)室的聲譽(yù)和信譽(yù)。
滿足法規(guī)和監(jiān)管要求:
許多國(guó)家和地區(qū)對(duì)實(shí)驗(yàn)室的清潔和消毒有明確的法規(guī)和監(jiān)管要求。
為了遵守這些規(guī)定,避免受到法律制裁或監(jiān)管機(jī)構(gòu)的處罰,分子實(shí)驗(yàn)室必須定期進(jìn)行清潔和消毒工作。
祛除分子診斷實(shí)驗(yàn)室中的核酸污染是確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性、保護(hù)實(shí)驗(yàn)人員和實(shí)驗(yàn)室安全、維護(hù)實(shí)驗(yàn)室聲譽(yù)和信譽(yù)以及滿足法規(guī)和監(jiān)管要求的重要措施。實(shí)驗(yàn)室管理者和實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)該高度重視實(shí)驗(yàn)室的清潔工作,制定并執(zhí)行科學(xué)的清潔和消毒方案,以確保實(shí)驗(yàn)環(huán)境的清潔和無(wú)菌。
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