摘要在全球的香料公司中，分析和了解香精與香料物質的成分是質量控制 (QC) 和研發(fā)(R&D) 實驗室工作的核心。本應用簡報重點介紹了 Agilent 8850 單通道氣相色譜儀的性能，它成功實施了用于詳細分離研發(fā)實驗室中所用香料的常用但耗時較長的氣相色譜方法，以及適用于 QC 分析的快速方法。安捷倫方法轉換軟件為用戶提供了在研發(fā)和 QC 等實驗室之間轉換色譜方法的簡單工具[1]。使用氦氣和氫氣作為載氣，演示了如何將耗時相對較長（50 分鐘）的研發(fā)方法轉換為快速（< 5 分鐘）QC 方法。氦氣節(jié)省模塊被用作氣體切換裝置，以便在同一個采樣序列中評估兩種載氣時實現高樣品通量。氦氣和氫氣的效率分別提高了 10 倍和 14 倍，且不會影響分離的色譜屬性或方法的精度和線性。最后，我們使用氫氣作為載氣，通過快速方法分析了三種受歡迎的市售產品：兩種香草提取物和一種香草香料。應用于市售復雜基質產品的快速方法達到了預期的性能標準，同時展現了出色的分離效率。

前言香精香料的吸引力每天都在影響著消費者購買產品的決策。隨著對營養(yǎng)成分的關注加深，消費者開始逐漸避免使用天然和人工 (N&A) 成分配制的產品，轉而選擇天然甚至有機成分。香草是深受消費者習慣變化影響的香料品種。它是香料之一，廣泛存在于絕大多數市售產品中[2]。最近香草豆面臨著供需壓力，使得生產高質量香草提取物作為獨立產品在雜貨店貨架上銷售或作為天然香草香精和香料的成分變得困難且成本高昂。在這些情況下，對香草提取物進行輕微摻假以擴大天然原料的供應變得吸引力；通常受到監(jiān)測的香草摻雜物包括乙基香草醛、丁香酚和愈創(chuàng)木酚[2,3]。但摻假會影響美國食品藥品監(jiān)督管理局制定的香草提取物鑒定標準。因此，香料公司依靠 QC 實驗室實施可靠且靈敏的分析技術，以篩查來料成分，確保從成分供應商處購買的材料符合預期純度標準，從而盡快將成分用于即將生產的香料配方。通常采用研發(fā)實驗室中采用的氣相色譜方法，但由于色譜柱柱長、色譜柱直徑和固定相的差異，難以統一研發(fā)和 QC 職能部門采用的方法。

安捷倫方法轉換軟件是統一氣相色譜方法的實用工具，尤其是當每個實驗室使用不同的氣相色譜柱時，該軟件內置于每個氣相色譜系統中并可供下載[1]。該工具支持直接轉換、考慮了要轉換的兩組色譜柱尺寸最佳效率的轉換，以及速度增益轉換選項。本應用簡報展示了如何將一種耗時的研發(fā)型方法轉換為一種快速、高效的 QC 方法，以滿足高樣品通量和更簡單的定量需求。展示了兩組方法轉換，一組使用氦氣作為載氣，另一組使用氫氣作為載氣。無論使用何種載氣，要轉換的初始方法都相同。分析標準品的精度和線性，以及在香草提取物中的應用都證明了轉換的成功。

實驗部分化學品與試劑購買了五種具有香草屬性的化學品，它們存在于香草提取物或香草香料中，或可作為摻假物在香草提取物中檢出。這些標準品包括香草醛 (≥ 97%, FCC, FG)、乙基香草醛 (≥ 98%, FCC, FG)、愈創(chuàng)木酚 (≥ 99%,FG)、丁香酚 (≥ 99%, FG) 和晶體，均購自 Sigma-Aldrich (St. Louis, MO,USA)。將無水癸烷 (≥ 99%) 作為內標，將無水 (200 proof) 乙醇 (≥ 99.5%) 作為制備標準品和香草提取物稀釋液的溶劑，這兩種化學品同樣購自 Sigma-Aldrich。三種常見品牌的香草提取物 ― 純香草提取物、有機香草提取物和香草香料（人工香料）購自在線零售商，然后將轉換后的方法應用于這些僅需極少樣品前處理的受歡迎市售產品。氫氣載氣方法使用純度規(guī)格為 99.9999%的實驗室氫氣，氦氣方法使用規(guī)格標準相似的實驗室氦氣。使用多組分標準品進行了重現性研究，該標準品中每種分析物的含量均為 100 ppm，包括作為內標的癸烷，其含量同樣為100 ppm。然后，在稀釋 10 倍的市售產品中，香草提取物的精度也得以體現。在 10–100000 ppm (10% v/v) 的范圍內，以 10 倍為增量進行了線性研究。用乙醇為五種分析物分別制備 100000 ppm標準品。10、100、1000 和 10000 ppm標準品由乙醇逐級稀釋。每種標準品中均含有與分析物濃度相當的癸烷。為定量分析從商店購買的香草提取物樣品中的分析物，創(chuàng)建了 100–5000 ppm 的工作校準范圍。使用之前在方法線性實驗中使用的 1000 和 10000 ppm 溶液制備500 和 5000 ppm 的多組分標準品。直接從之前制備的方法線性樣品中將 100 和1000 ppm 的等分溶液裝入樣品瓶。

儀器和方法本研究的整個過程均在 Agilent 8850 氣相色譜系統完成，該系統配備分流/不分流(S/SL) 進樣口、用于載氣切換的氦氣節(jié)省模塊（圖 1）和火焰離子化檢測器 (FID)。使用氦氣節(jié)省模塊作為載氣切換裝置，用戶可以將兩種載氣連接到模塊的入口，從而根據序列表中給定的方法確定向分流/不分流進樣口提供哪種氣體作為載氣。

將實驗室氦氣連接至氦氣節(jié)省模塊的氦氣通道，將實驗室氫氣連接至氦氣節(jié)省模塊的輔助氣體通道（圖  2）。輸出通道直接與分流/不分流進樣口的 EPC 的載氣通道連接。

連接兩種載氣的氦氣節(jié)省模塊簡化了氣相色譜儀的使用，在需要替代載氣時無需手動配置和重新配置氣體連接，此外還能在同一個序列中使用兩種載氣。這些優(yōu)勢既提高了靈活性，又提高了樣品通量，從而優(yōu)化了氣相色譜系統在夜間和周末的使用?？傮w而言，氦氣節(jié)省模塊提高了實驗室日常操作的效率。

色譜柱選擇方法轉換始于 60 m × 0.25 µm, 320 µm內徑 (id) Agilent J&W DB-1 色譜柱。60 mDB-1 色譜柱是氣相色譜進行香精和香料研發(fā)分析時常用的色譜柱類型。質量控制實驗室更適合使用 10 m, 100 µm 內徑色譜柱，以提高分析速度和效率，因此選擇了 10 m × 100 µm 內徑, 膜厚 0.1 µm的 J&W DB-1 色譜柱。為了逐步演示方法轉換，選擇了兩根額外的 J&W DB-1 色譜柱，并保持與 10 m × 100 µm 內徑色譜柱相同的相比率。這兩根額外的色譜柱規(guī)格分別為 20 m × 180 µm 內徑, 0.18 µm液膜厚度和 30 m × 250 µm 內徑,0.25 µm 液膜厚度。10、20 和 30 m 色譜柱的相比率保持恒定，為 249.25。表 1顯示了使用氦氣和氫氣作為載氣時四根DB-1 色譜柱的詳細操作條件。圖 3 展示了方法轉換軟件的使用，并展示了如何從最初的 50 分鐘方法中轉換得到不同色譜柱推薦的色譜條件。