MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(500次)

產(chǎn)品貨號(hào)：20311

產(chǎn)品規(guī)格：500次

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

　   MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的檢測(cè)。MTT可以被線(xiàn)粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物Formazan。在特定溶劑存在的情況下，可以被溶解。然后通過(guò)酶標(biāo)儀可以測(cè)定570nm波長(zhǎng)附近的吸光度。細(xì)胞增殖越多越快，則吸光度越高；細(xì)胞毒性越大，則吸光度越低。

    本試劑盒采用了的Formazan溶解液配方，無(wú)需去除原有的培養(yǎng)液，可以直接加入Formazan溶解液溶解Formazan。從而避免了由于去除培養(yǎng)液時(shí)Formazan被部分去除而引起的誤差。

   本試劑盒本底低，靈敏度高，線(xiàn)性范圍寬，使用方便。

    本試劑盒可以測(cè)定500個(gè)樣品。

包裝清單:

操作步驟：

1. 通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100μl 2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100μl 5000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。按照實(shí)驗(yàn)需要，進(jìn)行培養(yǎng)并給予0-10μl特定的藥物刺激。

2. 每孔加入20μl MTT溶液，在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)孵育4小時(shí)。

3. 每孔加入100μl Formanzan溶解液，在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)再繼續(xù)孵育。直至在普通光學(xué)顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)Formazan全部溶解。通常37℃孵育4小時(shí)左右，紫色結(jié)晶會(huì)全部溶解。如果紫色結(jié)晶較小較少，溶解的時(shí)間會(huì)短一些。如果紫色結(jié)晶較大較多，溶解的時(shí)間會(huì)長(zhǎng)一些，建議室溫或37℃過(guò)夜孵育。

4. 在570nm測(cè)定吸光度。如無(wú)570nm濾光片，可以使用560-600nm的濾光片。

注意事項(xiàng) ：

1. 由于使用96孔板進(jìn)行檢測(cè)，如果細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)，一定要注意蒸發(fā)的問(wèn)題。一方面，由于96孔板周?chē)蝗ψ钊菀渍舭l(fā)，可以采取棄用周?chē)蝗Φ霓k法，改加PBS、水或培養(yǎng)液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方，以緩解蒸發(fā)。

2. MTT溶液在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。

3. Formazan溶解液結(jié)凍或產(chǎn)生沉淀時(shí)可以37℃水浴孵育以促進(jìn)溶解，并且必須在全部溶解并混勻后使用。混勻過(guò)程請(qǐng)用移液槍輕輕吹勻，勿上下顛倒，避免氣泡。

4. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。