用3.5%PEG選擇性地沉淀血清中CIC,繼之用胰蛋白酶消化沉淀物中的抗體蛋白,分離出抗原部分,用反向間接血凝法測定HBsAg滴度。與不加胰蛋白酶的對照管比較,如HBsAg滴度升高,則說明有HBsAg-CIC的存在。
1.試劑
①pH8.4硼酸鹽緩沖液(BBS):配制法同*節(jié)中PEG沉淀試驗;
②7%PEG及3.5%PEG溶液:用BBS配制;
③10mg/mL胰蛋白酶溶液:用pH8.2巴比妥緩沖液配制。
2.操作步驟
(1)在測定管與對照管內(nèi)務加待測血清0.2mL。
(2)兩管各加pH8.4BBSl.8mL,將血清作1:10稀釋。
(3)各加7%PEG 2mL,充分混勻后,4~C冰箱放置18h。
(4)在10%左右條件下2 500r/min離心20min,棄上清
(5)將沉淀物懸浮于4mL 3.5%PEG溶液中,2 500r/rain離心20min,棄上清。
(6)于測定管中加入0.2mL胰蛋白酶溶液,對照管加0.2mLBBS,混勻后置37%水浴30rain,其間振蕩3—4次。取出后,立即置56%水浴5min。
(7)將測定管、對照管及未經(jīng)處理的血清分別作系列倍比稀釋,用反向間接血凝試驗檢測HBsAg滴度。
3.結(jié)果判斷
①測定管HBsAg滴度在1/16以上,且滴度高于對照管1個稀釋度以上者為HBsAg-CIC陽性;
②測定管與對照管HBsAg滴度相同,但其滴度高于血清游離HBsAg1個稀釋度以上者也為HBsAg-CIC陽性。
4.臨床意義 胰蛋白酶解離法檢測HBs-Ag-CIC簡便而敏感,有助于確定乙肝病程中有無抗原特異性復合物形成,估計是否有可能形成肝外系統(tǒng)病變。
相關(guān)產(chǎn)品
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權(quán)行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權(quán)等法律責任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。