WinSera血清使用中需要注意的問(wèn)題有哪些？

（一）被誤判為污染的“小黑點(diǎn)”

經(jīng)過(guò)熱處理的血清，往往沉淀物會(huì)增多，而這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像是污染物，常常會(huì)讓研究者誤以為血清遭到污染。然而，把血清放在37℃環(huán)境中，又會(huì)使此沉淀物進(jìn)一步增多，使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。

我們的經(jīng)驗(yàn)是拿到鏡下去觀察是否為細(xì)菌狀或真菌狀形態(tài)。還有就是做無(wú)菌培養(yǎng)，取一點(diǎn)血清在培養(yǎng)皿中，在培養(yǎng)箱里培養(yǎng)幾天，觀察沉淀物是否有變化。一般情況下，這些沉淀物并不會(huì)影響血清的正常使用，Lab里往往用0.22μM的濾膜過(guò)濾一下就繼續(xù)使用了。

（二）解凍血清

解凍血清時(shí)，請(qǐng)遵循推薦的分步解凍方法（-20℃→4℃→室溫）。實(shí)驗(yàn)表明，如果血清解凍溫度過(guò)高（如-20℃→37℃），很容易產(chǎn)生沉淀。解凍血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)搖勻，使溫度和成分均勻，減少沉淀的發(fā)生。請(qǐng)不要長(zhǎng)時(shí)間將血清放置在37℃環(huán)境中，如果放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，血清會(huì)變得混濁，血清中的許多不穩(wěn)定成分會(huì)受到破壞，從而影響血清的質(zhì)量。血清的熱滅活很容易引起沉淀物的增加，我們認(rèn)為這一步是不必要的。如需對(duì)血清進(jìn)行熱滅活，請(qǐng)遵循56℃、30min原則，隨時(shí)搖勻。如果溫度過(guò)高、時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或搖晃不均勻，沉淀物就會(huì)增加。

血清中出現(xiàn)沉淀物的原因有很多，但最常見的是血清中脂蛋白的變性，解凍后血清中還會(huì)存在纖維蛋白（形成凝塊的蛋白質(zhì)之一），這也是產(chǎn)生沉淀物的主要原因之一。然而，這些絮狀沉淀物雖然并不影響血清本身的質(zhì)量，但有可能會(huì)被誤判為污染物。如果要去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝在無(wú)菌離心管中，以1200rpm的速度離心，然后將上清液加入培養(yǎng)基中進(jìn)行過(guò)濾。

（三）保存血清