最近的2024年10月，利用Incucyte® 發(fā)CNS正刊的數(shù)量又達到了新高度，兩天5篇NATURE!

他們又是如何應(yīng)用Incucyte® 的呢？

中毒性表皮壞死松解癥（TEN）是一種由常見藥物誘導(dǎo)的致命皮膚反應(yīng)，已成為一個新興的公共衛(wèi)生問題。TEN患者會因角質(zhì)形成細(xì)胞死亡，而出現(xiàn)嚴(yán)重和突然的表皮脫離。通過蛋白質(zhì)組學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)TEN患者免疫細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞區(qū)室中I型和II型干擾素的顯著富集。Incucyte® 體外實驗發(fā)現(xiàn)，使用JAK抑制劑托法替尼（ tofacitinib）降低了角質(zhì)形成細(xì)胞的細(xì)胞毒性。體內(nèi)口服給藥改善了兩種不同的TEN小鼠模型的臨床和組織學(xué)疾病嚴(yán)重程度。

三陰性乳腺癌 （TNBC）因其高度侵襲性和高復(fù)發(fā)率而令人談虎色變，迫切需要開發(fā)更有效的治療方法。本文發(fā)現(xiàn)，AKT抑制劑與組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶EZH2抑制劑的藥物具有協(xié)同作用，并在體內(nèi)多個TNBC模型中促進持續(xù)的腫瘤消退，明確了其藥理作用。Incucyte® 被用于體外檢測藥物對腫瘤細(xì)胞系的殺傷作用。

圖2. Incucyte® 測試結(jié)果：NucLight Rapid Red試劑 （Sartorius，4717）標(biāo)記細(xì)胞，用Cytotox Green （Sartorius，4633）監(jiān)測細(xì)胞毒性。每2小時采集一次圖像，持續(xù)5天。使用Incucyte®軟件通過量化overlay的NucLight-red和Cytotox-green雙陽性細(xì)胞數(shù)（即死亡的細(xì)胞數(shù)）除以 NucLight-red 陽性細(xì)胞的總數(shù)來確定細(xì)胞毒性細(xì)胞的百分比。

人類產(chǎn)前皮膚由先天免疫細(xì)胞（包括巨噬細(xì)胞）組成，但這些細(xì)胞是否僅在免疫方面發(fā)揮作用，還是在形態(tài)發(fā)生中具有其他功能，尚不清楚。本文匯編了一份全面的產(chǎn)前人類皮膚多組學(xué)參考圖譜，結(jié)合單細(xì)胞和空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)數(shù)據(jù)，表征了皮膚的微解剖組織生態(tài)位。該圖譜揭示了非免疫細(xì)胞和免疫細(xì)胞之間的串?dāng)_是毛囊形成的基礎(chǔ)，與無疤痕傷口愈合有關(guān)，對皮膚血管生成至關(guān)重要。

圖3. Incucyte® 劃痕測試：成纖維細(xì)胞與巨噬細(xì)胞共培養(yǎng)可以增加傷口愈合。

晚期尿路上皮癌（UC）是一種經(jīng)常致命的疾病，具有顯著的遺傳異質(zhì)性。化療會誘導(dǎo)數(shù)百個晚期亞克隆突變的爆發(fā)。通過基因組計算工具觀察到，形成染色體外DNA （ecDNA）的SV（復(fù)雜結(jié)構(gòu)變異）具有頻繁的高拷貝數(shù)環(huán)狀擴增子特征，例如尿路上皮癌中的大多數(shù) CCND1（G1/S-特異性周期蛋白-D1基因），并包含額外的DNA片段并導(dǎo)致治療耐藥性的進化。在競爭試驗中，在順鉑或載體對照存在下，共培養(yǎng)等數(shù)量的具有GFP標(biāo)記的空載體和mCherry標(biāo)記的CCDN1游離型ecDNA的UMUC1細(xì)胞（CCDN1 UMUC1），使用Incucyte®活細(xì)胞成像系統(tǒng)測量 mCherry/GFP熒光信號的比率來監(jiān)測對化療的適應(yīng)性。

圖4. 用Incucyte®監(jiān)測4天的mCherry/GFP細(xì)胞比例示意圖（6個小時拍攝一次），以追蹤腫瘤細(xì)胞對化療的適應(yīng)性

圖5. CCND31 UMUC1細(xì)胞與對照細(xì)胞的比率，化療藥物順鉑的處理組明顯高于對照，說明CCND31 UMUC1細(xì)胞對化療有更佳的適應(yīng)性

只要放好您的細(xì)胞，其他交給Incucyte®吧！祝愿大家都能用Incucyte®發(fā)好文章！