IVIS Lumina LT Series III 是 Revvity 第三代小動物活體光學(xué)二維成像平臺，具有高靈敏度生物發(fā)光和熒光成像性能。該系統(tǒng)配備高靈敏 CCD 相機(jī)、避光成像室和全自動化的分析功能。作為的小動物活體成像平臺，IVIS 系統(tǒng)包括一整套全球?qū)嶒?yàn)室認(rèn)可的實(shí)用配件。

靈活、可擴(kuò)展、可升級

考慮到靈活性，IVIS Lumina LT 是一種多功能系統(tǒng)，可以輕松容納培養(yǎng)皿或微孔板進(jìn)行體外研究，以及用于器官的離體成像。此外，通過 5 - 12.5 (cm) 可調(diào)節(jié)視野以及擴(kuò)展鏡頭，可將視野范圍擴(kuò)展至 2.5 - 24 (cm)。利用此功能可以對五只小鼠或兩只中等體型大鼠進(jìn)行同時成像。同時可以進(jìn)行升級，擁有增強(qiáng)的熒光成像功能，以提高從可見到近紅外成像光譜的靈敏度。

出色的成像效果

IVIS Lumina LT 同時具備高質(zhì)量的熒光和生物發(fā)光成像功能，并且濾光片能用于綠光至近紅外范圍的熒光成像。所有 IVIS 儀器出廠前均經(jīng)過復(fù)雜且嚴(yán)格的光學(xué)校準(zhǔn)，保證在同一實(shí)驗(yàn)條件下，使用不同儀器、不同拍攝參數(shù)所獲取的成像數(shù)據(jù)的一致性及可重復(fù)性，方便不同用戶間的數(shù)據(jù)驗(yàn)證及交流。此外，Living Image 軟件結(jié)合儀器校準(zhǔn)、背景扣除和圖像算法，使用戶獲得高質(zhì)量、可重復(fù)性的定量結(jié)果。

(1)IVIS Lumina LT 可以提供5個成像視野

圖1 IVIS Lumina LT 成像系統(tǒng)提供5個成像視野

(2)IVIS Lumina LT 可以對同一動物進(jìn)行多重光學(xué)標(biāo)記成像，如下圖2左是使用酶激活型熒光探針Cat B 680 FAST 用來監(jiān)測 4T1-luc2 腫瘤模型中組織蛋白酶B的活性，OsteoSense 800 可以靶向骨架結(jié)構(gòu)。圖2右是感染后19h腦膜炎小鼠的體內(nèi)和離體腦組織者圖像，分別顯示Lux細(xì)菌熒光素酶 (500 nm) 和GFAP-Luc 螢火蟲熒光素酶 (620 nm) 信號。大部分細(xì)菌信號僅限于腦中腦脊液被困在腦室間隙（背側(cè)）或注射部位（腹側(cè)）的區(qū)域，而GFAP在整個大腦中被誘導(dǎo)且在大腦的某些區(qū)域存在不同強(qiáng)度的生物發(fā)光信號[1]。

圖2 多重光學(xué)標(biāo)記成像

(3)IVIS Lumina 活體成像在各個領(lǐng)域的應(yīng)用十分廣泛。在腫瘤分布應(yīng)用，使用熒光標(biāo)記方法進(jìn)行腫瘤定位觀察，人胃腺癌細(xì)胞系 BGC823-iRFP細(xì)胞的體外細(xì)胞形態(tài)和增殖能力與 BGC823 細(xì)胞相似，第20天，小鼠接種BGC823或BGC823- iRFP后，使用 IVIS Lumina活體成像系統(tǒng)進(jìn)行觀察。與BGC823細(xì)胞相比，BGC823-iRFP細(xì)胞在體內(nèi)和離體均表現(xiàn)出強(qiáng)信號；第18天，腹腔注射BGC823-iRPF小鼠出現(xiàn)明顯信號[2]。

圖3 BGC823-iRFP體外和體內(nèi)成像

在神經(jīng)系統(tǒng)的應(yīng)用，Tau是一種微管相關(guān)蛋白，主要在神經(jīng)元中表達(dá)，在神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)病機(jī)制中起關(guān)鍵作用。通過使用通過基因編輯手段將將GFP的 cDNA整合到 MAPT基因的exon1中（稱為 TauGFP/GFP)，使用Revvity的 IVIS Lumina活體成像系統(tǒng)發(fā)現(xiàn)在大腦、睪丸、視神經(jīng)、坐骨神經(jīng)和腎臟的熒光強(qiáng)度最大，而在脾臟、肝臟或胃中未觀察到信號[3]。

圖4 TauGFP/GFP小鼠腎臟中GFP的檢測

專業(yè)的活體光學(xué)成像分析軟件

IVIS Lumina LT 擁有圖像獲取及分析軟件。主要特點(diǎn)包括具有探針庫的成像向?qū)Ш妥詣釉O(shè)置功能，便于掃描參數(shù)設(shè)置及批量處理，以加快數(shù)據(jù)分析。具有圖像算法工具用于去除組織自發(fā)噪音，提高圖像質(zhì)量及定量準(zhǔn)確度。

圖5絕對校準(zhǔn)允許長時間的研究以及世界各地實(shí)驗(yàn)室之間的結(jié)果比較

強(qiáng)大的硬件配置

IVIS Lumina LT 采用背照射、背部薄化科學(xué)1級 CCD 相機(jī)可在整個可見至近紅外光譜上提供高量子效率，以熱電方式 (Peltier) 冷卻至 -90 °C，確保了低暗電流和低噪音。具有10個激發(fā)濾光片和4個發(fā)射濾光片適用于體外、離體及表面成像。以及具有集成的氣體麻醉接口可同時對5只小鼠進(jìn)行持續(xù)麻醉成像。

配套活體成像試劑

Revvity 提供種類豐富的生物發(fā)光底物、生物發(fā)光腫瘤細(xì)胞株和發(fā)光細(xì)菌、熒光探針、熒光探針標(biāo)記及納米粒子標(biāo)記試劑等活體成像相關(guān)試劑，可以幫助研究人員更好地了解疾病相關(guān)早期生物學(xué)變化、跟蹤疾病進(jìn)展、幫助指導(dǎo)藥物發(fā)現(xiàn)過程以及評估候選藥物的功效和安全性。

圖6 不同活體成像試劑成像結(jié)果

綜上，Revvity IVIS Lumina LT小動物活體成像可以實(shí)現(xiàn)高靈敏度生物發(fā)光二維成像、覆蓋至近紅外光譜波段范圍的熒光成像、基于切倫科夫輻射原理的放射性同位素成像，是市場上信賴的小動物活體光學(xué)成像系統(tǒng)。同時Revvity具有三維成像儀器、熒光探針、標(biāo)簽、染料等試劑，可為您提供全面的體內(nèi)解決方案。

參考文獻(xiàn)

[1] Kadurugamuwa JL, Modi K, Coquoz O, Rice B, Smith S, Contag PR, Purchio T. Reduction of astrogliosis by early treatment of pneumococcal meningitis measured by simultaneous imaging, in vivo, of the pathogen and host response. Infect Immun. 2005 Dec;73(12):7836-43. doi: 10.1128/IAI.73.12.7836-7843.2005. PMID: 16299273; PMCID: PMC1307043.

[2] Hu H, Zhang Z, Wang R, Wang Y, Jin J, Cai L, Yang J, Duan H, Wu Z, Fang Z, Liu B. BGC823 Cell Line with the Stable Expression of iRFP720 Retains Its Primary Properties with Promising Fluorescence Imaging Ability. DNA Cell Biol. 2020 May;39(5):900-908. doi: 10.1089/dna.2019.5057. Epub 2020 Feb 25. PMID: 32096664.

[3] Vallés-Saiz L, Peinado-Cahuchola R, ávila J, Hernández F. Microtubule-associated protein tau in murine kidney: role in podocyte architecture. Cell Mol Life Sci. 2022 Jan 27;79(2):97. doi: 10.1007/s00018-021-04106-z. PMID: 35084555; PMCID: PMC8794918.