2024年2月，國家藥監(jiān)局藥品審評中心發(fā)布《低分子量肝素類仿制藥藥學研究與評價技術指導原則（試行）》，該指導原則適用于采用豬小腸黏膜制備的低分子量肝素 （low-molecular-weight heparin，LMWH）的原料藥及其注射劑仿制藥。

肝素類藥品是臨床常用的抗凝血藥及溶栓藥，肝素 (heparin) 及低分子量肝素 (LMWH) 等均被納入《國家基本藥物目錄》 《世界衛(wèi)生組織基本藥品標準清單》，隨著人口老齡化、心腦血管疾病等發(fā)病率不斷上升，肝素類藥品的市場規(guī)模和臨床價值正在持續(xù)上升【1】。與傳統(tǒng)的化學結構明確的小分子藥物不同，肝素類藥品作為多組分生化藥，原材料來自動物組織，成分復雜，本身具有化學成分異質性及相對分子質量多分散性的特點，很難完全表征其復雜的結構特性。所以，采用多種技術手段對肝素類藥物分子量這一關鍵質量屬性進行深入研究是非常必要的。

現(xiàn)行版《中國藥典》已收載肝素類化藥品種4個，今年國家藥典委陸續(xù)發(fā)布了那曲肝素鈣、依諾肝素鈉、達肝素鈉以及他們的注射液國家藥品標準草案7個，其中包括重要的分子量與分子量分布的檢查項。四部通用技術要求中，0514 分子排阻色譜法是測定相對分子量大小及分布的主要分析手段。島津對相關品種的分析推薦凝膠滲透色譜（GPC）分析系統(tǒng)，除了選擇符合藥典或標準系統(tǒng)適用性要求的凝膠色譜柱外，選用高性能、高穩(wěn)定性的示差折光檢測器是非常關鍵的。

我們對比測試過池溫控器安裝前后室溫變化對于分析穩(wěn)定性影響情況，如圖1所示。由于示差折光檢測器對室溫波動極為敏感，新型RID-20A檢測器安裝了雙重溫度控制器件，可通過消除室溫變化產(chǎn)生的影響來確保出色的基線穩(wěn)定性。此外，該檢測器還新增參比池自動清洗功能和驗證支持功能，可大大提高GPC分析的效率。

科技發(fā)展永無止境，以普通肝素和低分子肝素中均包含的天然戊糖結構為基礎改良的全人工合成的磺達肝癸鈉這類新型抗血栓藥物的誕生，為患者提供更多安全選擇。

但是這類高選擇性Xa因子抑制劑，它的結構中含有五個糖單元，每個糖單元上都結合了磺酸鈉基團，具有很強的極性，在常規(guī)反相C18柱保留不佳。即便采用離子色譜分析，由于需要淋洗液濃度較高，導致電導檢測困難。不能采用常規(guī)色譜分離分析手段，磺達肝癸鈉的分子量分析又該如何進行呢？

島津小身材好身手的臺式MALDI-TOF就非常適合這類化合物的分析，可以在無色譜分離的情況下直接對樣品的分子量及其分布進行分析。

磺達肝癸鈉質譜圖見上圖5。由圖可見，樣品檢測到9個分子量依次相差102 Da的離子，依次為 m/z 1705.0、m/z 1603.0、m/z1500.9、m/z1398.9、…m/z888.7，分別對應磺達肝鈉有 0-8個SO3Na基團被H離子取代后并丟失一個Na離子的化合物形式。

另外，樣品還檢測到m/z1727.0的離子峰，對應磺達肝癸鈉的[M-H]形式，質譜信號強度顯著低于 [M-Na]-及其他 SO3Na 基團被H離子取代后并丟失一個Na離子的化合物形式，這可能是由于磺達肝癸鈉富含鈉離子，相比丟失氫離子，磺達肝癸鈉在質譜上更容易丟失鈉離子而形成減鈉峰。除此之外，樣品還檢測到SO3Na基團及1個Na離子全部被H離子取代后的減鈉峰，如m/z866.5對應磺達肝癸鈉的[M-8X-2Na+H]-化合物形式（X代表一個SO3Na基團被一個H離子取代）。

我們建立了MALDI-8030在負離子模式下分析磺達肝癸鈉分子量的方法，操作簡單，分析快速，為色譜分析困難或色譜串聯(lián)質譜檢測困難的樣品分析提供理想的參考檢測手段，具有較高的實用價值。

如對島津GPC和MALDI-TOF產(chǎn)品及應用方案感興趣的客戶，歡迎聯(lián)系島津當?shù)?/span>銷售詳詢。

島津一直致力于將分析技術不斷應用于藥物分析領域，為制藥行業(yè)客戶提供高效優(yōu)質的解決方案，全力助力產(chǎn)業(yè)降本增效！

文獻引用：【1】胡小娟. 肝素類藥品生產(chǎn)現(xiàn)場核查常見問題分析與探討，中國醫(yī)藥工業(yè)雜志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2023， 54(4)：617-621

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