細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)（BET，Bacterial Endotoxins Testing）是測(cè)量水樣品、原材料、腸道外藥物中細(xì)菌內(nèi)毒素污染的必要測(cè)定程序。全球藥典協(xié)調(diào)統(tǒng)一對(duì)細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)有規(guī)范性專論，概述了3種常用的方法（即凝膠法、動(dòng)態(tài)濁度法、動(dòng)態(tài)顯色法）。顯色法分為終點(diǎn)法和動(dòng)態(tài)法這兩種形式。在此項(xiàng)研究中，我們同時(shí)使用96孔板和Sievers^® Eclipse細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)儀這兩種動(dòng)態(tài)顯色法平臺(tái)，并比較了它們的檢測(cè)時(shí)間和結(jié)果。

*CV：Coefficients of Variation，變異系數(shù)

此項(xiàng)研究由一位合格的分析員來(lái)完成，每種方法的10次測(cè)定所花的準(zhǔn)備時(shí)間一致。分析員同時(shí)使用完整的96孔板和Eclipse微孔板，每次測(cè)定時(shí)共測(cè)量21份樣品。在每種方法的10次測(cè)定中，5次使用產(chǎn)品，另5次僅使用水樣品。完成此項(xiàng)研究的分析員擁有豐富的移液操作經(jīng)驗(yàn)和10年的鱟試劑測(cè)試經(jīng)驗(yàn)。

表1：Sievers Eclipse平臺(tái)和96孔板的檢測(cè)時(shí)間比較

表2：Sievers Eclipse平臺(tái)和96孔板的10次測(cè)定結(jié)果比較

*所有的值均包括常規(guī)水和常規(guī)產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果

與96孔板相比，Sievers Eclipse每次測(cè)定的平均時(shí)間縮短了27-39分鐘。平均設(shè)置時(shí)間因分析員和所運(yùn)行的具體檢測(cè)而異。產(chǎn)品檢測(cè)往往需要進(jìn)行多次稀釋，因此分析員需要較長(zhǎng)時(shí)間來(lái)準(zhǔn)備。但水樣品檢測(cè)可以簡(jiǎn)化，需要的準(zhǔn)備時(shí)間較短。此項(xiàng)研究結(jié)果表明，假設(shè)分析員每天進(jìn)行2次常規(guī)測(cè)定，Sievers Eclipse平臺(tái)可使該分析員每年節(jié)省約260小時(shí)或6.5周的工作時(shí)間（假設(shè)分析師一年工作48周，一周工作40小時(shí)）。分析員每年節(jié)省近14%的時(shí)間，可以將省下來(lái)的時(shí)間用于實(shí)驗(yàn)室和本部門的其它工作。

此外，現(xiàn)今普遍使用的96孔板要求進(jìn)行繁瑣的移液步驟。假設(shè)分析員檢測(cè)21份樣品（即能用96孔板檢測(cè)的最多樣品數(shù)），如果使用連續(xù)移液器（Repeater Pipette），則大約需要進(jìn)行242個(gè)移液步驟。如果使用多道移液器（Multi-channel Pipettor）和試劑槽來(lái)存放鱟試劑，雖能減少移液步驟，但操作時(shí)間仍然太長(zhǎng)，而且技術(shù)上容易出錯(cuò)。在同樣情況下如果用Sievers Eclipse來(lái)檢測(cè)21份樣品，則僅需進(jìn)行27個(gè)移液步驟，而且設(shè)置時(shí)間和得到結(jié)果的時(shí)間都大大縮短（見(jiàn)下面的圖1和圖2）。

圖1：Sievers Eclipse和96孔板的連續(xù)移液器操作比較

圖2：Sievers Eclipse和96孔板的多道移液器操作比較

表3：藥典要求