裝備應(yīng)考慮的主要問題及功能配置  

    通用實(shí)驗(yàn)室醫(yī)用離心機(jī)可能會(huì)深入到每一個(gè)技術(shù)相關(guān)實(shí)驗(yàn)室，是一個(gè)潛在發(fā)展的市場(chǎng)，應(yīng)當(dāng)引起裝備管理方面的高度重視。在明確實(shí)驗(yàn)室的主次技術(shù)需求及相應(yīng)離心方法的前提下，zui大rcf、rpm、樣品量是選擇離心技術(shù)的基本參數(shù)，要在此基礎(chǔ)上考慮離心機(jī)的選型、主要功能及兼顧功能的配置。  

    3．1醫(yī)用實(shí)驗(yàn)室常規(guī)離心技術(shù)功能需求  

    3．1．1RNA離心制備  

    培養(yǎng)細(xì)胞在低速離心（水平轉(zhuǎn)頭，300xg）完成細(xì)胞分離、裂解后，加RNA沉淀提取液，于4℃，10000～12O00xg（角轉(zhuǎn)頭，微量1．5／2．0mlEppendorf管，或≥15ml、50ml管）分步提??；組織樣本需先經(jīng)勻漿預(yù)處理。  

    3．1．2DNA離心制備  

    水平轉(zhuǎn)頭，2000xg左右，1．5／2．0mlEppendof管，15ml、50mlFalcon管或更大體積；再經(jīng)12000～27000xg。制備質(zhì)粒DNA：角轉(zhuǎn)頭，250ml或500m1／瓶，5000-6000xg；15-50rnl／管，12000～27000xg；4℃或特定溫度。  

    3．1．3載體表達(dá)蛋白分離  

    角轉(zhuǎn)頭，250～500ml／瓶，4000xg；15～50mlFalcon管，3O00xg；角轉(zhuǎn)頭，50ml管／瓶，27000xg；4℃。  

    3．1．4細(xì)胞純化和亞細(xì)胞器分離  

    用差速離心法分離細(xì)胞器和大小差別懸殊的細(xì)胞。由低速分步到高速離心，細(xì)胞器的沉降順序是細(xì)胞核、線粒體、溶酶體、過氧化酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、核蛋白體，所有過程控溫4℃。  

    收集細(xì)胞：水平轉(zhuǎn)頭，850～1850xg，優(yōu)選錐形底管；分離細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)，3300xg；核提取，25O00xg。進(jìn)一步純化分離將聯(lián)用超速離心。  

    密度梯度速率沉降法分離密度相近而大小不等的細(xì)胞或__細(xì)胞器。采用合適的密度梯度介質(zhì)，水平轉(zhuǎn)頭，1OOxg左右。等密度梯度法分離細(xì)胞器，10000-30O00xg。  

    3．1．5細(xì)胞學(xué)涂片離心通過在個(gè)別機(jī)型上配置細(xì)胞學(xué)涂片離心轉(zhuǎn)頭，實(shí)現(xiàn)一次4片離12,；據(jù)細(xì)胞學(xué)特性，rc啦制在5O～1000xg。選購時(shí)需注意離心容器的zui小樣品處理量。  

    3．1．6離心超濾、濃縮、抽提  

    配合市售離心過濾濃縮管（1．5～80ml，Coming，Millipore，Spectrum等）或樣品抽提容器使用，采用角轉(zhuǎn)頭或水平轉(zhuǎn)頭，角轉(zhuǎn)頭可使超濾膜與離心力不成直角而避免濃度極化；1000～l2O00xg不等，可參考所購容器的使用說明。  

    3．1_7微孔板離心  

    酶標(biāo)板、TC板、PCR板以及樣品抽提純化板的離心，在通用離心機(jī)可通過在大容量水平轉(zhuǎn)頭上配置微孔板吊架（rcf_-般將低于轉(zhuǎn)頭的額定值）或選用專門離心轉(zhuǎn)頭實(shí)現(xiàn)，≥1O00xg。每個(gè)吊架可放1～4塊標(biāo)準(zhǔn)96孔板或更多。 


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