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細胞學堂 | 超實用的細胞培養(yǎng)基知識盤點

來源:武漢普諾賽生命科技有限公司   2024年08月16日 13:24  


細胞培養(yǎng)基不僅為細胞提供必要的營養(yǎng)物質,還為細胞的生長和繁殖提供適宜的環(huán)境。在細胞培養(yǎng)的過程中,選擇合適的培養(yǎng)基是養(yǎng)好細胞的第一步。


本期細胞學堂將為大家詳細介紹一些特殊的培養(yǎng)基,以及用時的相關指標,幫助您快速上手選擇合適的培養(yǎng)基,以滿足不同實驗需求。



常見細胞培養(yǎng)基

常見細胞培養(yǎng)基可分為基礎培養(yǎng)基、完-全培養(yǎng)基和無血清細胞培養(yǎng)基三類。

在去年發(fā)布的干貨中,我們詳細介紹了關于MEM、DMEM、RPMI 1640、無血清培養(yǎng)基等常見培養(yǎng)基,感興趣的可以回顧下。

Tip:

基礎培養(yǎng)基、無血清培養(yǎng)基、完-全培養(yǎng)基有什么區(qū)別?

基礎培養(yǎng)基主要是指未添加血清的合成培養(yǎng)基以及一些專為特定原代細胞設計的專用基礎培養(yǎng)基。

無血清培養(yǎng)基是指通過添加已知成分的組分(如轉鐵蛋白、白蛋白、胰島素等)替代血清,用于特定細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基。

完-全培養(yǎng)基是指在基礎培養(yǎng)基的基礎上添加了血清的培養(yǎng)基,可能還含有一些特殊的細胞生長因子、抗生素(如雙抗)等。




特殊細胞培養(yǎng)基

特殊細胞培養(yǎng)基屬于合成培養(yǎng)基,通常需要搭配血清或者血清替代物來配制成完-全培養(yǎng)基后使用。

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Fischer's培養(yǎng)基

由Glen Fischer在美國國家癌癥研究所設計研制,最初用于小鼠白血病細胞的培養(yǎng),現(xiàn)主要用于造血細胞的培養(yǎng),如淋巴母細胞和淋巴細胞的培養(yǎng)。

該培養(yǎng)基含有多種細胞生長所需的氨基酸、維生素以及無機鹽等成分,不含蛋白質、脂類或任何外源性生長因子。

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William's E培養(yǎng)基

由William和Gunn共同研制,主要用于大鼠肝上皮細胞的培養(yǎng),也可用于其他哺乳動物的肝細胞培養(yǎng)。

該培養(yǎng)基含有多種細胞生長所需的氨基酸、維生素以及無機鹽等成分,不含蛋白質、脂類或任何外源性生長因子,可以根據研究需要來調整L-谷氨酰胺的用量,在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細胞的生長與增殖。

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MCDB 131培養(yǎng)基

MCDB是為特定細胞設計的低蛋白和無血清培養(yǎng)的培養(yǎng)基,MCDB 131是MCDB培養(yǎng)基的一種,是由Knedler和Ham設計開發(fā)出來的,最初用于培養(yǎng)人微血管內皮細胞(HMVEC)。隨著深入的研究,MCDB 131培養(yǎng)基除用于內皮細胞外,還可用于包括肝細胞、平滑肌細胞、心肌細胞在內的多種細胞類型。

MCDB 131培養(yǎng)基不同于傳統(tǒng)培養(yǎng)基之處在于,其含有微量元素、腐胺、腺嘌呤、胸腺嘧啶以及更高濃度的氨基酸和維生素。該培養(yǎng)基在使用時常與表皮生長因子(EGF)、氫化可的松、谷氨酰胺以及低濃度血清搭配使用,血清的添加濃度需根據細胞類型而定。

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Opti-MEM I 減血清培養(yǎng)基

Opti-MEM I 減血清培養(yǎng)基,是一種經過改良的最-低必需培養(yǎng)基,可以在減少50%常規(guī)血清用量的情況下,維持細胞的正常增殖。這一特性使其在細胞轉染等實驗操作中尤為適用。




培養(yǎng)基選用指標

01

糖的濃度

高糖培養(yǎng)基通常適合高代謝率及高密度細胞的培養(yǎng)。

02

酚紅

酚紅是一種酸堿指示劑,用于輔助判斷試劑的pH值變化。酸性環(huán)境下偏黃色,堿性環(huán)境下偏紫色。

03

GlutaMAX

L-丙氨酰-L-谷氨酰胺,是L-谷氨酰胺的升級版本。L-谷氨酰胺在溶液中容易降解,但L-丙氨酰-L-谷氨酰胺具有良好的穩(wěn)定性,可以為L-谷氨酰胺的替代物。

04

鈣、鎂離子

鈣、鎂離子在細胞培養(yǎng)中有助于細胞彼此相連,增強細胞的黏附性,培養(yǎng)懸浮細胞可選擇無鈣鎂離子的培養(yǎng)基。



以上是關特殊細胞培養(yǎng)基及選用指標的介紹,更多細胞培養(yǎng)相關干貨,請持續(xù)關注細胞學堂專欄~

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