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實時熒光定量技術(shù)服務(wù)
— 華夏遠(yuǎn)洋明星產(chǎn)品
*部分、背景知識
實時熒光定量PCR（Real-time PCR）即通過熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性探針對PCR反應(yīng)過程進行實時監(jiān)測，根據(jù)PCR指數(shù)擴增期間熒光信號的變化來即時測定對應(yīng)特異產(chǎn)物的含量，并據(jù)此推斷目的基因的初始量。該方法可以檢測細(xì)胞、組織或微生物中基因表達變化，比較不同組織的mRNA表達差異。如不同藥物濃度處理后相關(guān)基因表達水平高低變化；驗證基因芯片結(jié)果；siRNA干擾的實驗結(jié)果等。與常規(guī)PCR（RT-PCR）相比，實時熒光定量PCR具有*的靈敏度、高度的重復(fù)性和的特異性。因為PCR擴增過程閉蓋操作，避免了反應(yīng)產(chǎn)物的污染，大大提高了結(jié)果的可靠性，現(xiàn)已成為現(xiàn)階段*的核酸分子定量檢測的金標(biāo)準(zhǔn)，在基因表達研究和臨床疾病檢測等領(lǐng)域已得到廣泛應(yīng)用。
第二部分、為何稱之為明星產(chǎn)品？
服務(wù)：
一、 實驗設(shè)備：所用熒光定量PCR儀為伯樂（BIO-RAD）公司儀器；
二、 試劑耗材配備：所用試劑為SYBR Green I 的升級替代產(chǎn)品Eva Green，*白色低腰八聯(lián)排管；
三、 論文發(fā)表標(biāo)準(zhǔn)：論文可發(fā)表在國外任何影響因子的刊物上；
四、 參觀學(xué)習(xí)：實驗中，客戶可以隨時來參觀學(xué)習(xí)詢問；
五、 實驗要求：根據(jù)客戶要求每個反應(yīng)免費重復(fù)2-3次。樣本在60個以上，基因3個或以上（含內(nèi)參），RNA提取和反轉(zhuǎn)錄項目免費。
第三部分、技術(shù)流程
1、RNA的提??；
2、DNase I 消化RNA中殘留的DNA；
3、瓊脂糖凝膠電泳，判斷RNA的質(zhì)量；
4、RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA；
5、引物設(shè)計、合成、驗證，反應(yīng)體系和反應(yīng)條件優(yōu)化；
6、上機檢測：包括擴增曲線、溶解曲線；
7、數(shù)據(jù)整理、表達量計算、作圖；
8、實驗報告的書寫，包括詳細(xì)的儀器、耗材、試劑、引物信息、反應(yīng)體系、實驗條件、實驗圖片、實驗數(shù)據(jù)及結(jié)果分析。
第四部分、送樣要求
細(xì)胞（≥106）、組織（≥100mg）、血液（≥1ml）、葉片（≥100mg）等樣品材料，基因組DNA或總RNA（體積≥20μl，濃度≥50 ng/μl）。外地客戶可以干冰郵寄，北京客戶直接公司專員取樣。
第五部分、背景資料
客戶提供物種信息、GeneBank號、目的基因名稱或特異基因的序列。
第六部分、提供結(jié)果
實驗所用所有儀器試劑及耗材、引物序列；RNA電泳圖和PCR特異性電泳圖；詳細(xì)的實驗過程；原始數(shù)據(jù)（包括擴增曲線和熔解曲線）及數(shù)據(jù)分析結(jié)果。
第七部分、服務(wù)內(nèi)容、報價、周期
| 服務(wù)編號 | 服務(wù)項目 | 實驗說明 | 價格 | 周期 |
| HX-R1 | RNA提取 | 包括RNA提取、DNase I消化殘留的DNA、RNA電泳 | 100元/樣品 （樣品大于30個半價） | 2-6個工作日 |
| HX-R2 | 反轉(zhuǎn)錄 | 反轉(zhuǎn)錄、內(nèi)參基因測試 | 80元/樣品 （樣品大于30個半價） | 2-6個工作日 |
| HX-T1 | 探針合成 | 探針設(shè)計、合成、驗證 | 2000元/基因 | 5-10個工作日 |
| HX-S1 | 相對定量-染料法 | 引物設(shè)計、合成、驗證、上機檢測、3次實驗重復(fù)，數(shù)據(jù)分析。 | 180元/基因·樣本 （10個樣品以上起做） | 5-15個工作日 |
| HX-S2 | 相對定量-TaqMan探針法 | 引物設(shè)計、合成、驗證、上機檢測、3次實驗重復(fù)，數(shù)據(jù)分析 | 180元/基因·樣本 （10個樣品以上起做） | 5-15個工作日 |
| HX-S3 | 定量染料法 | 引物設(shè)計、合成、驗證、上機檢測、3次實驗重復(fù)，數(shù)據(jù)分析 | 180元/基因·樣本 （10個樣品以上起做） | 5-15個工作日 |
| HX-S4 | 定量TaqMan探針法 | 引物設(shè)計、合成、驗證、上機檢測、3次實驗重復(fù)，數(shù)據(jù)分析 | 180元/基因·樣本 （10個樣品以上起做） | 5-15個工作日 |
| HX-05 | 構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)品 | PCR擴增、純化、OD值檢測、濃度計算 | 600元/基因 | 2-6個工作日 |
| HX-06 | 標(biāo)準(zhǔn)曲線 | 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線 | 800元/基因 | 2-6個工作日 |
【收款方式：本公司所有科研服務(wù)均收取60%預(yù)付款，實驗完成后，1個月內(nèi)結(jié)清尾款。具體優(yōu)惠方式和細(xì)節(jié)歡迎您來信或。】
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北京華夏遠(yuǎn)洋科技有限公司
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