核膜標志物
細胞器標志物抗體是細胞生物學中常用的研究工具。靶向特定的抗體有助于了解蛋白的亞細胞定位以及探究其生物功能,也可以在細胞器分離提取物的蛋白質(zhì)印跡分析中用作陽性對照。
細胞核膜(nuclear envelope)是位于真核生物的核與細胞質(zhì)交界處的雙層結(jié)構(gòu)膜,核膜對核內(nèi)外物質(zhì)的交通有高度選擇性,控制細胞核內(nèi)外物質(zhì)交換運輸和信息傳輸。細胞核膜主要由外層核膜(outer nuclear membrane)、內(nèi)層核膜(inner nuclear membrane)、核孔復合體(nuclear pore complex)、核纖層(nuclear lamina)等部分組成。外層核膜與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相連,上面錨定著核糖體。在內(nèi)外層核膜融合的區(qū)域鑲嵌著超過60種蛋白組成的核孔復合體,它們是聯(lián)系細胞核、細胞質(zhì)信息和物質(zhì)的選擇性通道,只允許一定大小的分子通過。核纖層是位于內(nèi)層核膜下方的一層類似網(wǎng)狀的結(jié)構(gòu),核纖層蛋白(Lamin)主要由A型核纖層蛋白(Lamin A和Lamin C)和B型核纖層蛋白(Lamin B1和Lamin B2)組成。Lamin與細胞質(zhì)的中間纖維蛋白類似,通過頭尾聚合形成穩(wěn)定的核骨架,在維持細胞核膜形態(tài)以及核孔復合體定位方面起著重要的作用。內(nèi)層核膜上面有大量的跨膜蛋白如Lamin B受體(Lamin B receptor,LBR)、Emerin、LAP2(Lamina associated polypeptide 2)、SUN1等,這些內(nèi)層核膜蛋白可以與核纖層蛋白結(jié)合,也可以直接結(jié)合染色質(zhì)或DNA來調(diào)控染色質(zhì)的組裝、DNA復制和基因轉(zhuǎn)錄等過程。
層粘連蛋白A/C(Lamin A/C)存在于細胞核膜中,可維持細胞結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、細胞運動、機械傳感、染色體組織、基因調(diào)控、細胞分化、DNA損傷修復、端粒保護等。Lamin A/C基因的突變、蛋白質(zhì)的錯誤加工和核纖層蛋白A/C的失調(diào)等可導致各種疾病。
圖1 LMNA抗體免疫組化結(jié)果圖
(貨號:K106814P)
核纖層蛋白B1(Lamin B1)由LMNB1基因編碼,除了維持細胞核的形狀和完整性外,還在細胞增殖和衰老、染色體分布和聚集、基因表達、DNA復制和DNA損傷修復等方面發(fā)揮著重要的調(diào)控作用。LMNB1的異常表達與神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。
圖2 LMNB1抗體蛋白質(zhì)印跡分析結(jié)果圖
(貨號:K112668P)
Emerin由EMD基因編碼,可通過穩(wěn)定和促進核肌動蛋白皮質(zhì)網(wǎng)絡(luò)的形成來介導膜錨定到細胞骨架。Emerin可參與多種生物學過程,包括對轉(zhuǎn)錄因子活性和定位的直接和間接調(diào)節(jié)、細胞內(nèi)和細胞間的信號傳導、核-細胞骨架力學轉(zhuǎn)導與核結(jié)構(gòu)、染色質(zhì)濃縮和表觀遺傳修飾等。
圖3 EMD抗體蛋白質(zhì)印跡分析結(jié)果圖
(貨號:K111036P)
已有一些蛋白被鑒定可用作核膜標志物(見表1)。
表1核膜標志物
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