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【超離應用】快速密度梯度形成技術，優(yōu)化病毒載體純化流程

來源：貝克曼庫爾特國際貿易（上海）有限公司 2024年05月30日 12:08

技術背景

隨著現(xiàn)代生物醫(yī)學研究的不斷深入，病毒載體作為一種強大的工具，在基因治療和基因編輯等領域發(fā)揮著至關重要的作用。然而，病毒載體的純化過程往往耗時且復雜，這在一定程度上限制了相關研究的進展。今天，我們就來探討一種全新的方法——利用VTi 90垂直轉子與CsCl（氯化銫）密度梯度離心技術，來加速病毒載體的純化過程，提高實驗效率。

方法介紹

研究團隊通過使用VTi 90垂直轉子和Optima XPN超速離心機，結合CsCl密度梯度離心技術，對病毒載體純化過程進行了優(yōu)化。通過多段離心，調整離心速度和離心時間，實現(xiàn)了在更短時間內達到密度梯度平衡的目標。

實驗過程

在實驗中，研究團隊首先將病毒載體樣品與CsCl溶液混合，然后將其加入Quick-Seal熱封管中。再使用VTi 90轉子進行離心，通過調整離心速度和離心時間，使樣品在離心管內形成穩(wěn)定的密度梯度。離心結束后，通過分餾的方式收集不同密度的樣品組分，并使用折射儀測量各組分并繪制密度梯度曲線。通過比較不同實驗步驟的密度梯度曲線，找到與舊步驟密度梯度曲線相同的實驗條件，確保了樣品條帶位于相同位置。

離心結果示意圖：

實驗結果

基于 Optima XPN超速離心機對于分段離心步驟設置的支持（在一次運行中運行多個轉速步驟），研究團隊最終找到了一種能夠在80分鐘（50+30分鐘）內達到密度梯度平衡的優(yōu)化方案，較之前16小時的舊步驟提升了近12倍效率。

以更高的速度開始分離可以幫助更快地形成密度梯度。
將運行速度降低足夠長的時間可以:

與現(xiàn)有的(較慢的)步驟獲得相同的效果，將目標條帶保留在相同的位置。
平坦化密度梯度曲線，可提供更高的條帶分辨率。

結語

加速密度梯度形成、優(yōu)化病毒載體純化效率是一項具有重要意義的研究工作，不僅為病毒載體純化領域帶來了新的突破，也為廣大科研工作者提供了更高效、更便捷的實驗方法，從而降低了實驗成本和時間成本，為相關領域的研究提供了有力支持！

如果您對以上方案感興趣，不妨看看相關離心產品，以下組合搭配即助您輕松實現(xiàn)病毒載體純化流程：

Optima X系列智能型超速離心機

Optima XPN系列配備益于初學者操作的 eXpert 智能軟件程序，同時為密度梯度離心等方法提供強大支持。產品還具有增強型數(shù)據管理功能，支持客戶 GMP 流程。

主要型號：Optima XPN-100 / 90 / 80

基礎型號：Optima XE-100 / 90

最大轉速（rpm）：100,000 / 90,000 / 80,000

最大相對離心力（xg）：802,000 / 694,000 / 548,300

Vti 90垂直轉子

Vti 90垂直轉子，最大相對離心力可達到645,000xg，最大轉速下K因子低至6。分離沉降系數(shù)約為60s的空殼AAV顆粒，僅需80min，為分離病毒顆粒的理想選擇。

最大RPM：90 ,000
最大RCF：645,000 xg
K因子：6
離心管數(shù)量/體積/大小/尺寸：

? 8 x 5.1mL

? ? x 2 in

? 13 x 51 mm

轉頭容量：40.8mL

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