如環(huán)境樣品中的聚酰胺（PA）與天然蛋白的紅外譜圖非常相似，軟件自動區(qū)分難度很大。對于環(huán)境樣品而言，蛋白又是非常難被處理掉的雜質(zhì)，因此能夠準(zhǔn)確區(qū)分 PA 與蛋白則可以成為評價一個微塑料自動化測試方法是否準(zhǔn)確的重要因素之一。

我們利用市售的可溯源 PA 及蛋白標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行顆粒定性準(zhǔn)確度驗(yàn)證，由于這兩種顆粒在高倍顯微鏡下外觀上存在明顯差別，因此可通過 8700 LDIR 高倍攝像頭的自動拍照功能對顆粒圖像進(jìn)行二次校對，以確定軟件自動定性結(jié)果是否準(zhǔn)確。兩種標(biāo)準(zhǔn)品的具體測試信息如圖 1 所示：

為優(yōu)化譜庫自動區(qū)分 PA 及蛋白的能力，首先利用初始譜庫測試了純品蛋白 PA 及純品 PA 的樣品。由于實(shí)驗(yàn)室環(huán)境為非潔凈空間，可能存在污染情況。定性列表如圖 2 左圖所示，在純品蛋白樣品中共檢出 106 個顆粒，其中 65 個顆粒為蛋白，占比約為 60%。樣品中未檢出 PA 顆粒。通過顯微鏡確認(rèn)均與蛋白顆粒的外觀狀態(tài)不同，如圖 2 右圖所示。

然后按照同樣的方法測試了 PA 標(biāo)準(zhǔn)品。如圖 3 所示，結(jié)果中共檢出 2482 種顆粒，其中 1157 顆被鑒定為 PA，而有 729 個顆粒被定性為蛋白，約占總顆粒數(shù)的 29.1 %。但我們通過高清圖像二次確認(rèn)，被誤識別蛋白的定性結(jié)果匹配度都較低，均低于 0.7。

為了提高定性結(jié)果準(zhǔn)確度，將 30 個被誤判為蛋白的譜圖添加入譜庫中并命名為 PA。利用新建立的譜庫重新選擇一個小區(qū)域進(jìn)行測試，在測試的 102 個顆粒中，87 個顆粒被定性為 PA，并未發(fā)現(xiàn)蛋白顆粒檢出，如圖 4 所示。

在優(yōu)化譜庫的基礎(chǔ)上，測試了 PA 與蛋白的混標(biāo)。測試過程中自動采集了每個顆粒的高清圖像，以便于后續(xù)進(jìn)行準(zhǔn)確度交叉驗(yàn)證。在小區(qū)域測試結(jié)果中共檢出 60 個顆粒，其中有 28 顆定性為 PA，23 顆定性為蛋白。經(jīng)過高清圖像確認(rèn)，所有 PA 和蛋白均被正確歸類，沒有出現(xiàn)假陽性結(jié)果，如圖 5 所示。