薄層色譜的基本原理你了解嗎
薄層色譜又叫薄板層析,是色譜法中的一種,是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術,屬固―液吸附色譜,它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點,一方面適用于少量樣品(幾到幾微克,甚至0.01微克)的分離;另一方面在制作薄層板時,把吸附層加厚加大,因此,又可用來精制樣品,此法適用于揮發(fā)性較小或較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的質。此外,薄層色譜法還可用來跟蹤有機反應及進行柱色譜之前的一種“預試”。
薄層色譜是在被洗滌干凈的玻板(10×3cm左右)上均勻的涂一層吸附劑或支持劑,待干燥、活化后將樣品溶液用管口平整的毛細管滴加于離薄層板一端約1cm處的起點線上,晾干或吹干后置薄層板于盛有展開劑的展開槽內(nèi),浸入深度為0.5cm。待展開劑前沿離頂*約1cm附近時,將色譜板取出,干燥后噴以顯色劑,或在紫外燈下顯色。
基本原理
色譜法的基本原理是利用混合物中各組分在某一物質中的吸附或溶解性能的不同,或和其它親和作用性能的差異,使混合物的溶液流經(jīng)該種物質,進行反復的吸附或分配等作用,從而將各組份分開。薄層色譜是一種微量、快速和簡便的色譜方法。由于各種化合物的極性不同,吸附能力不相同,在展開劑上移動,進行不同程度的解析,根據(jù)原點至主斑點中心及展開劑前沿的距離,計算比移值(Rf):
化合物的吸附能力與它們的極性成正比,具有較大極性的化合物吸附較強,因此Rf值較小。在給定的條件下(吸附劑、展開劑、板層厚度等),化合物移動的距離和展開劑移動的距離之比是一定的,即Rf值是化合物的物理常數(shù),其大小只與化合物本身的結構有關,因此可以根據(jù)Rf值鑒別化合物。
薄層色譜可適用小量樣品(幾到幾十微克甚至0.01μg)的分離:也可用于多達500mg樣品的分離,是近代有機化學中用于定性,定量的一種重要手段。適用于那些揮發(fā)性小的化合物,以及在高溫下易發(fā)生化學變化而不能用氣相色譜分析的物質。
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