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STR鑒定有哪些操作流程和注意事項(xiàng)
STR鑒定的操作流程主要包括細(xì)胞提取、PCR擴(kuò)增、電泳分離、數(shù)據(jù)分析和結(jié)果比對(duì)。
細(xì)胞提取：從待驗(yàn)證的細(xì)胞樣本中提取DNA。這通常通過使用特定的提取方法，如酚/氯仿法或商業(yè)化的DNA提取試劑盒來完成。
PCR擴(kuò)增：提取的DNA進(jìn)行PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）擴(kuò)增，以增加待測(cè)STR位點(diǎn)的數(shù)量，從而提高檢測(cè)敏感性。在PCR反應(yīng)中，使用具有特異性的引物來擴(kuò)增選擇的STR位點(diǎn)。
電泳分離：PCR反應(yīng)產(chǎn)物與分析媒介（如聚丙烯酰胺凝膠）混合后，通過電泳技術(shù)進(jìn)行分離。電泳時(shí)，DNA片段按照大小被分離成不同的條帶，從而形成電泳圖譜。
數(shù)據(jù)分析：將電泳分離得到的STR位點(diǎn)圖譜進(jìn)行檢測(cè)和解讀。這通常通過使用自動(dòng)DNA分析設(shè)備，通過軟件分析電泳圖譜，測(cè)定每個(gè)STR位點(diǎn)處相應(yīng)的等位基因數(shù)量來完成。
結(jié)果比對(duì)：將待驗(yàn)證細(xì)胞的STR位點(diǎn)與已知樣本（如參考樣本或數(shù)據(jù)庫中的數(shù)據(jù)）進(jìn)行比對(duì)分析。通過比對(duì)，確定待驗(yàn)證細(xì)胞樣本與參考樣本的相似性，以得出驗(yàn)證結(jié)果。
注意事項(xiàng)包括：
在進(jìn)行STR測(cè)定時(shí)，要遵循操作規(guī)范，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
選擇合適的樣品進(jìn)行測(cè)定，確保樣品具有代表性。
在使用STR測(cè)定儀器之前，進(jìn)行儀器的校準(zhǔn)，以保證測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性。
及時(shí)記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，避免遺漏或錯(cuò)誤。
保持實(shí)驗(yàn)環(huán)境的穩(wěn)定，避免外部因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。
此外，還需要注意樣品寄送的方式和時(shí)間，以及結(jié)果的交付方式。樣品應(yīng)通過加干冰或冰袋的方式寄送，并保證細(xì)胞數(shù)量足夠。常規(guī)檢測(cè)時(shí)間通常為2~3周，超常檢測(cè)時(shí)間則在10個(gè)工作日之內(nèi)。
總的來說，STR鑒定是一項(xiàng)復(fù)雜且需要高度專業(yè)性的技術(shù)，建議在專業(yè)實(shí)驗(yàn)室或?qū)I(yè)人員的指導(dǎo)下進(jìn)行。
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