冰凍切片是一種在低溫條件下使組織快速冷卻到一定硬度,然后進行切片的方法。
因其制作過程較石蠟切片快捷、簡便,而多應(yīng)用于手術(shù)中的快速病理診斷。
制備步驟:
將組織在恒溫冷凍機里面切片。
冷凍腔內(nèi)的溫度一般設(shè)置為-18℃至-25℃,根據(jù)不同組織調(diào)節(jié)不同腔溫,平時應(yīng)將冷凍頭放置在冷凍臺上。
冷凍切片機應(yīng)長期處在冷凍恒溫狀態(tài)。
1、當冰凍組織提取好之后,在冷凍頭上放少量的OCT或羧田基纖維素(可用普通膠水代替),放上組織,速凍。
2、待組織凍結(jié)后,將冷凍頭裝刀切片機上。
3、粗切,修出切面細切幾張,用毛筆刷去刀上組織片。
4、放下抗卷板,開始切片,切片速度一般為5-6微米,切出的片子用載玻片貼附后立即放入甲醇冰醋酸液(97ml甲醇+3ml冰醋酸)中固定,固定時間為10-20秒。
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