無(wú)血清培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)，提供了更方便的純化和下游加工處理以及更穩(wěn)定的性能。無(wú)血清培養(yǎng)基的選擇通常根據(jù)：(1)細(xì)胞或產(chǎn)物特異性; (2)細(xì)胞系對(duì)無(wú)血清培養(yǎng)基的適應(yīng)性。

1、細(xì)胞或產(chǎn)物特異性

如果使用無(wú)血清培養(yǎng)基是為了促進(jìn)一種特殊類型細(xì)胞的生長(zhǎng)，那么這種選擇性是由培養(yǎng)基的選擇性決定的。例如，MCDB 153用于培養(yǎng)表皮角質(zhì)細(xì)胞，LHC-9用于培養(yǎng)支氣管上皮細(xì)胞，HITES用于培養(yǎng)小細(xì)胞肺癌細(xì)胞、MCDB130用于培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞等。

如果只是為了不用血清培養(yǎng)連續(xù)細(xì)胞系，如CHO細(xì)胞或雜交瘤細(xì)胞，從而減少細(xì)胞產(chǎn)物中含有濾過(guò)性毒素或血清蛋白的可能，那么這種選擇的范圍就會(huì)更廣，并有許多可供選擇。然而，可能有必要篩選不同廠家的商品，以確保：①細(xì)胞生長(zhǎng)；②產(chǎn)物結(jié)構(gòu)可以持；③不需要長(zhǎng)的適應(yīng)期；④到貨時(shí)間和價(jià)格可以接受。

當(dāng)從創(chuàng)建者或細(xì)胞庫(kù)獲得一個(gè)細(xì)胞系的時(shí)候，他們會(huì)推薦合適的培養(yǎng)基，除非培養(yǎng)基無(wú)貨或與其他成分不匹配才需更換培養(yǎng)基?？赡艿脑挘詈眠€是用創(chuàng)建者推薦的培養(yǎng)基，因?yàn)樗赡苁谴_保該細(xì)胞系保持其特異性的唯(空格)一途徑。可參考本文的部分無(wú)血清培養(yǎng)基的適應(yīng)性。

2、細(xì)胞系對(duì)無(wú)血清培養(yǎng)基的適應(yīng)性

許多連續(xù)細(xì)胞系，如HeLa、CHO-K1或小鼠骨髓瘤可能可以適應(yīng)缺乏血清的生長(zhǎng)環(huán)境。適應(yīng)過(guò)程常常是一個(gè)很長(zhǎng)的選擇周期，此間只有細(xì)胞群體中的少數(shù)被選擇出來(lái)，因此在此選擇過(guò)程中確保細(xì)胞系的性質(zhì)不喪失是很重要的。如果是骨髓瘤細(xì)胞，其目的是用于制備雜交瘤；而如果是CHO細(xì)胞，則是用于轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)，因此用無(wú)血清培養(yǎng)基的選擇培養(yǎng)必須在融合和轉(zhuǎn)染之前進(jìn)行，使選擇過(guò)程中丟失特性的危險(xiǎn)性降到最(空格)低。

適應(yīng)無(wú)血清培養(yǎng)基通常要經(jīng)過(guò)幾次連續(xù)的傳代培養(yǎng)，在每次傳代時(shí)或傳代前，或根據(jù)適應(yīng)的程度確定更換頻率，使血清濃度逐漸降低。一旦細(xì)胞在某一血清濃度條件下形成穩(wěn)定的增殖狀態(tài)，就可用更低濃度的血清將細(xì)胞傳代培養(yǎng)，直至穩(wěn)定的生長(zhǎng)增殖再次形成，而后再次稀釋血清。

如果是懸浮培養(yǎng)，要計(jì)算活細(xì)胞的數(shù)量，根據(jù)活細(xì)胞的數(shù)量稀釋細(xì)胞懸液，此時(shí)需要保持的最(空格)低細(xì)胞濃度要比正常傳代培養(yǎng)所需的細(xì)胞濃度高一些。對(duì)于單層細(xì)胞培養(yǎng)，可在傳代培養(yǎng)的前幾天先降低培養(yǎng)基中的血清濃度，而后再用新的低濃度培養(yǎng)基進(jìn)行傳代培養(yǎng)。在適應(yīng)過(guò)程中，可能我要在培養(yǎng)基中添加一些已知的因子來(lái)代替血清。

對(duì)于那些在無(wú)血清培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的增殖細(xì)胞，加入血清有可能抑制其生長(zhǎng)。生長(zhǎng)因子， 如TGF-B能夠抑制上皮細(xì)胞的生長(zhǎng)，EGF抑制A431細(xì)胞的生長(zhǎng)。