Q1:Cocoon® 是否只適用于T細(xì)胞嗎？是否也適用于自然殺傷細(xì)胞 (NK) 或造血干細(xì)胞 (HSC) 的制造工藝？

A1:Cocoon® 設(shè)計(jì)用于支持T細(xì)胞、造血干細(xì)胞、NK 細(xì)胞和粘附細(xì)胞培養(yǎng)工作。簡而言之，Cocoon® 是一種培養(yǎng)容器，我們通過封閉和無菌的方式實(shí)現(xiàn)液體的自動流動。

Q2:是否探索過縮短 CAR-T 生產(chǎn)流程的方法？

A2:我們探索過。我們目前正在開發(fā)的流程將統(tǒng)一零到三天活動的單元操作，包括選擇、激活和基因修飾。這樣就能配制出可在體內(nèi)擴(kuò)增的輸液產(chǎn)品。隨著整個市場流程的變化，我們正在確保我們能夠適應(yīng)當(dāng)前的趨勢。

Q3:Cocoon® 能連接其他設(shè)備或制造平臺嗎？

A3:Cocoon® 平臺可連接其他設(shè)備和平臺，包括龍沙的 4D LV Nucleofector® 平臺。

盒式平臺的靈活性符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，其輸入和輸出線可連接到各種加工設(shè)備，以增加附加功能。該平臺的靈活性有利于與其他設(shè)備連接。驅(qū)動液體進(jìn)出 Cocoon® 的泵系統(tǒng)并與其他設(shè)備連接。

Q4:cassette可存儲多少體積的培養(yǎng)基？

A4:目前，我們有兩種不同的cassette可供選擇，它們都是標(biāo)準(zhǔn)的。我們可以添加額外的培養(yǎng)基袋，將總體培養(yǎng)基用量增加到大約3升。從一開始，我們就努力確保能夠整合所有所需的試劑和液體，這樣操作員在移除或添加介質(zhì)時就不需要額外的干預(yù)。我們正在開發(fā)新的Cocoon® cassette，以增加存儲量和細(xì)胞輸出能力。

Q5:如何處置一次性cassette？

A5:一次性cassette通常會像其他生物危險(xiǎn)品一樣進(jìn)行處理。cassette內(nèi)有過濾器，可為某些機(jī)制吸入無菌空氣。我們的重點(diǎn)是對這些過濾器進(jìn)行使用后完整性測試，因此可能需要接觸這些過濾器。不過，一旦您的材料從cassette中輸出，就可以按照當(dāng)?shù)氐囊?guī)定，像處理其他生物危險(xiǎn)材料一樣進(jìn)行處理。

Q6:如何進(jìn)行培養(yǎng)基交換？

A6:Cocoon® 采用改良的灌流培養(yǎng)方式。我們可以將細(xì)胞材料保持在增殖室中，也就是我們培養(yǎng)細(xì)胞的地方，但我們可以移除大部分培養(yǎng)基或緩沖液。這樣，我們就可以進(jìn)行洗滌、細(xì)胞濃縮和重新配制。我們還可以進(jìn)行擴(kuò)增，以交換培養(yǎng)基和溶氧檢測。我們有一條再循環(huán)管線，可將氧氣通過被動氣體擴(kuò)散回培養(yǎng)基，從而有助于高效使用培養(yǎng)基。

Q7:預(yù)計(jì)廠家何時會從臺式Cocoon®轉(zhuǎn)向tree-based Cocoon®？

A7：我們預(yù)計(jì)，一旦tree-based 準(zhǔn)備就緒并可投入商業(yè)使用。

我們設(shè)計(jì)的 Cocoon® Tree 版本與現(xiàn)有的 Cocoon® 版本盡可能相同。我們期望的模式是在工藝開發(fā)、工藝優(yōu)化和臨床前工作中使用臺式儀器來啟動，然后在需要擴(kuò)大規(guī)模時，利用潔凈室現(xiàn)有的地面空間來實(shí)施 Tree。我們設(shè)計(jì)的 Tree 可在大多數(shù)潔凈室中使用，無需特殊結(jié)構(gòu)或改動。

我們希望，隨著臨床試驗(yàn)需求的增加，吞吐量也能隨之增加，這樣就能實(shí)現(xiàn)無縫連接。我們預(yù)計(jì)會在 1/2 期領(lǐng)域進(jìn)行轉(zhuǎn)移，但這并不妨礙有人在只使用幾個cocoon的情況下使用改良版的 Tree。我們希望它盡可能靈活，這樣我們就為不同的群體及其不同的需求提供支持。

Q8:現(xiàn)場支持的實(shí)際效果如何？

A8:外部現(xiàn)場支持團(tuán)隊(duì)是由細(xì)胞治療經(jīng)驗(yàn)豐富的專業(yè)應(yīng)用支持專家組成的。在資格認(rèn)證和預(yù)防性維護(hù)方面，已經(jīng)建立了基礎(chǔ)設(shè)施，以確保我們能夠?yàn)樵絹碓蕉嗟默F(xiàn)場設(shè)備提供支持。我們正在積極主動地提前為這些設(shè)備提供支持，以確保每個人都能盡快行動起來。

Q9:Cocoon® 的研發(fā)工作在哪里開展？

A9:龍沙從加拿大 Octane Biotech 公司獲得了這項(xiàng)技術(shù)。我們的主要研發(fā)機(jī)構(gòu)位于安大略省金斯頓。我們還在北美各地設(shè)有多家研發(fā)機(jī)構(gòu)。

我們正在迅速擴(kuò)大規(guī)模，以滿足需求和不斷改進(jìn)平臺的總體需要。隨著 Tree 和工藝開發(fā)服務(wù)的發(fā)展，我們已在北美擴(kuò)展了更多設(shè)施。目前，我們有多個不同的場所為這些活動提供支持。

Q10:Cocoon® 需要哪些特定的基礎(chǔ)設(shè)施？

A10:就基本單元本身而言，所標(biāo)明的用途是在 A 級或 B 級環(huán)境中使用，但有時預(yù)期用途說明與實(shí)際使用情況之間會有差距。我們有一些小組自行決定將其用于較低等級的房間。在設(shè)施要求方面，需要典型的潔凈室基礎(chǔ)設(shè)施、電源要求和連接這些設(shè)備的網(wǎng)絡(luò)，包括氧氣和二氧化碳。

Q11:貼壁細(xì)胞能否在 Cocoon® 中擴(kuò)增?

A11:在許多方面，增殖室的結(jié)構(gòu)與 T 型培養(yǎng)瓶類似。它是一種堅(jiān)硬的剛性結(jié)構(gòu)，用于進(jìn)行細(xì)胞懸浮、細(xì)胞培養(yǎng)或貼壁細(xì)胞培養(yǎng)。最近，我們看到更多的再生醫(yī)學(xué)療法投入使用，因此我們正在開發(fā)其他幾種應(yīng)用來支持這種技術(shù)。我們的目標(biāo)適應(yīng)癥不僅僅局限于腫瘤學(xué)。我們希望為盡可能多的應(yīng)用提供服務(wù)，而且由于 Cocoon® 的開放式可編程特性，我們不會局限于 CAR-T 生產(chǎn)和單元操作。大部分底層功能都支持間充質(zhì)干細(xì)胞和其他細(xì)胞類型，這些細(xì)胞都可以在 Cocoon® 中培養(yǎng)。

Q12:你們是否已開始與獲得美國食品及藥物管理局批準(zhǔn)的現(xiàn)有細(xì)胞療法合作，以提高產(chǎn)能和降低成本？如果沒有，這方面的阻力是什么？

A12:臨床試驗(yàn)越深入，生物制品許可申請 (BLA) 就越難做出改變，尤其是在培養(yǎng)方式方面，例如從袋式培養(yǎng)到硬質(zhì)結(jié)構(gòu)培養(yǎng)，或從人工培養(yǎng)到自動培養(yǎng)基交換。

在臨床試驗(yàn)的各個階段，審查水平都會提高，在 BLA 階段達(dá)到ding峰。要對已獲批準(zhǔn)的產(chǎn)品進(jìn)行改造，成本非常高昂。

我們看到最感興趣的是那些已經(jīng)取得了一些成功的企業(yè)，他們在意識到面臨的生產(chǎn)挑戰(zhàn)后，正在開發(fā)更多的管線產(chǎn)品。與其試圖重新發(fā)明一種已獲商業(yè)批準(zhǔn)的產(chǎn)品，不如把重點(diǎn)放在即將推出的管線產(chǎn)品上，并在這些產(chǎn)品的基礎(chǔ)上不斷改進(jìn)。這是一項(xiàng)持續(xù)不斷的工作。與我們合作的大多數(shù)團(tuán)隊(duì)都處于臨床前或第一階段的活動中。