人類誘導多能干細胞(hiPSCs)是一類可用于疾病建模、藥物開發(fā)和組織工程領(lǐng)域的多能誘導干細胞。與CRISPR-Cas9等功能強大的基因編輯技術(shù)結(jié)合后，可根據(jù)不同患者的特性進行疾病相關(guān)遺傳變異的研究和識別。

      然而，培養(yǎng)hiPSCs的步驟較為繁瑣，細胞對異常的處理和操作非常敏感，任何操作的問題都有可能導致細胞和遺傳毒性應(yīng)激的積累，進而導致不良分化和多能性喪失。基因編輯建立單細胞衍生的hiPSC克隆過程中常用的技術(shù)往往過于復雜或粗暴，導致單細胞克隆效率低下。此外，它們在確保衍生培養(yǎng)物單克隆性方面存在局限性。為此，英國iotaSciences公司推出了可實現(xiàn)100%單細胞分離的isoPick單細胞可視化分選系統(tǒng)，有效解決了培養(yǎng)hiPSCs單克隆過程中的困難。

      如右上圖所示，單細胞可視化分選系統(tǒng)isoPick采用納升級的網(wǎng)格式單細胞腔室技術(shù)（GRID技術(shù)），可實現(xiàn)高通量、高自動化的單細胞可視化分選；確保分選所得的單細胞樣品中只有一個單細胞，結(jié)果可驗證、可追蹤；分選過程非常溫和，能夠確保更高的單細胞存活率，達到更佳的克隆生長效果。單細胞可視化分選系統(tǒng)isoPick可全自動進行單細胞的分選、拾取并轉(zhuǎn)移1.5 µl至200 µl的液體至PCR管或96孔板中。

      使用isoPick從GRIDs內(nèi)分選hiPSC單細胞置于Laminin-521,Vitronectin-N, Synthemax和iMatrix (Laminin-511)4種不同基質(zhì)且含有培養(yǎng)基的96孔板中。以第7-10天內(nèi)的時間計算得出的單細胞克隆效率可以發(fā)現(xiàn)，無論使用的包被基質(zhì)或hiPSC細胞系，平均克隆效率均>70%（上圖），明顯高于其他通常使用的方法(包括FACS)，表明isoPick對敏感單細胞的溫和處理，能夠確保細胞的高存活率和更好的克隆生長效果。

      isoPick使用戶能夠以快速、高效、自動化的方式從多樣、異質(zhì)的細胞群體中分離單個細胞。GRID腔室非常適合用于觀察和記錄單個細胞的分離過程。 用戶可將單個細胞分離并直接置入96孔板用于細胞克隆。相比傳統(tǒng)方法，這種方法用簡單的線性工作流程，顯著提高了細胞分離與克隆效率，操作流程高度自動化，可以將樣品無縫銜接單細胞組學的后續(xù)操作。

單細胞可視化分選系統(tǒng)的優(yōu)勢：

● 全自動化流程

● 操作非常簡單 對細胞無損傷

● 結(jié)果可追蹤

● 分離效率高達100%

● 直接轉(zhuǎn)移到PCR管或96孔板

● 結(jié)構(gòu)緊湊，體積小巧

文獻舉例：

      單細胞可視化分選系統(tǒng)相關(guān)文獻發(fā)表于Cell、Advanced Science、Small Methods、Nature Communications 等期刊，如下摘引了近年三篇具有代表性的文獻和大家分享。

● Soitu C, Stovall‐Kurtz N, Deroy C, et al. Jet‐Printing Microfluidic Devices on Demand[J]. Advanced Science, 2020, 7(23): 2001854.

● Gangoso E, Southgate B, Bradley L, et al. Glioblastomas acquire myeloid-affiliated transcriptional programs via epigenetic immunoediting to elicit immune evasion[J]. Cell, 2021, 184(9): 2454-2470. e26.

● Deroy C, Nebuloni F, Cook P R, et al. Microfluidics on Standard Petri Dishes for Bioscientists[J]. Small Methods, 2021, 5(11): 2100724.

● Deroy C, Wheeler J H R, Rumianek A N, et al. Reconfigurable microfluidic circuits for isolating and retrieving cells of interest[J]. ACS Applied Materials & Interfaces, 2022, 14(22): 25209-25219.

● Oliveira N M, Wheeler J H R, Deroy C, et al. Suicidal chemotaxis in bacteria[J]. Nature Communications, 2022, 13(1): 7608.

樣機體驗：

      為更好地服務(wù)中國科研工作者，Quantum Design 中國引進了單細胞可視化分選系統(tǒng)-isoPick樣機，將為大家提供為專業(yè)的售前、銷售、售后技術(shù)支持，歡迎各位老師參觀試用！