大多數(shù)情況下IIF法需在固定的組織切片上進行抗體檢測,然后組織固定可影響抗體的反應性,在ICA檢測時需采用冷凍切片而不是甲醛等固定方法。
在檢測胰島細胞表面抗體(1CSA)時,需采用經(jīng)膠原酶消化后游離、懸浮的大鼠、小鼠或人胰島細胞。細胞懸浮于組織培養(yǎng)基中有助于修復酶消化時膜損傷。然后采用不同的第二抗體檢測,包括熒光或放射性標記抗體,和125I標記的蛋白A。ICSA診斷敏感性不足50%,特異性高達95%~99%。
在功能檢測中,ICSA陽性的IDDM血清抑制游離胰島細胞受葡萄糖刺激后的胰島素釋放,將人ICSA陽性血清被動灌注人小鼠胰腺中,可抑制其釋放胰島素,而且表面結合的抗體能激活補體從而參與補體依賴的抗體介導的細胞毒作用(C,AMC)。C,AMC是體外檢測ICSA的敏感方法,據(jù)報道其診斷敏感性為30%~50%,特異性96%~98%,約30%I級IDDM患者的C,AMC為陽性。由于ICSA檢測既繁瑣又很難標準化。
經(jīng)典的ICA檢測不僅具有很高的疾病預測價值,而且可同時檢測多種胰島細胞抗原相應的自身抗體,其敏感性較GAD、胰島素和其他單一抗原抗體檢測要高。對新發(fā)病的1型糖尿病患者的敏感性超過80%,但特異性較其他單抗體要低,1型糖尿病高發(fā)病人群中·ICA陽性率高于健康人群。瑞典有4.1%健康兒童存在ICA,英國有2.8%,法國有1.8%,西班牙僅0.35%。在這些國家中l(wèi)型糖尿病發(fā)病頻率相似。反之,ICA陽性人群患1型糖尿病的危險性遠遠高于正常人。例如高滴度ICA(如大于20-40JDF單位)標志著疾病的進展期。比較“歲以下:[CA陽性的年輕青少年,其患糖尿病的危險性較40歲以上者的高15倍。因此,在一項研究中,調(diào)查了57名ICA陽性者,其中25名13.2歲以下研究組中有10名zui終發(fā)展成糖尿病,而25名年齡在13.2~工9歲組中僅4名發(fā)展為糖尿病,57位ICA陽性者僅4名年齡超過19.5歲。家族成員中有ICA陽性者,其發(fā)展為l型糖尿病的風險增加,其患病風險率高于HLADQ等位基因攜帶者。ICA陽性并伴有其他自身抗體如GAD或IAA抗體者,較單純ICA陽性者發(fā)展成1型糖尿病的危險率高出3~5倍。ICA持續(xù)價陽性(如>g0JDF單位)者,較ICA反復波動或一過性增高者有更大的危險性。
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