一、激光共焦顯微鏡是一種用于材料科學(xué)領(lǐng)域的分析儀器,可實(shí)現(xiàn)最多500幅圖像自動(dòng)拼圖,水平分辨率12μm,z軸分辨率0.01μm。測(cè)量亞微米級(jí)的線寬、線與面的粗糙度,透明膜厚等數(shù)據(jù),原位觀察和獲取材料表面形貌,三維輪廓。
二、發(fā)展背景:
(1)在傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)上,激光掃描共聚焦顯微鏡用激光作為光源,采用共軛聚焦原理和裝置,并利用計(jì)算機(jī)對(duì)所觀察的對(duì)象進(jìn)行數(shù)字圖像處理觀察、分析和輸出。其特點(diǎn)是可以對(duì)樣品進(jìn)行斷層掃描和成像,進(jìn)行無(wú)損傷觀察和分析細(xì)胞的三維空間結(jié)構(gòu)。
(2)同時(shí),利用免疫熒光標(biāo)記和離子熒光標(biāo)記探針,該技術(shù)不僅可觀察固定的細(xì)胞、組織切片,還可以對(duì)活細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、分子、離子及生命活動(dòng)進(jìn)行實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)觀察和檢測(cè),在亞細(xì)胞水平上觀察諸如Ca2+,pH值,膜電位等生理信號(hào)及細(xì)胞形態(tài)的變化,成為形態(tài)學(xué)、分子細(xì)胞生物學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、藥理學(xué)、遺傳學(xué)等領(lǐng)域中新一代強(qiáng)有力的研究工具,極大地豐富了人們對(duì)細(xì)胞生命現(xiàn)象的認(rèn)識(shí)。
三、原理:組織樣品中如果有可被激發(fā)的熒光物質(zhì),受到激發(fā)后發(fā)出的熒光經(jīng)原來(lái)入射光路直接反向回到分光鏡,通過(guò)探測(cè)針孔時(shí)先聚焦,聚焦后的光被光電倍增管(PMT)探測(cè)收集,并將信號(hào)輸送到計(jì)算機(jī),處理后在計(jì)算機(jī)顯示器上顯示圖像。
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