LX-2細(xì)胞培養(yǎng),人肝星形細(xì)胞培養(yǎng)攻略
LX-2,人肝星形細(xì)胞。肝星形細(xì)胞在慢性酒精中毒、乙型和丙型肝炎、脂肪性肝病、肥胖和糖尿病等疾病中扮演重要角色,激活后為肌成纖維細(xì)胞,是負(fù)責(zé)肝纖維化的主要細(xì)胞類型。
該細(xì)胞系名稱來源于原始論文第一作者的名字,是2004年取HSC細(xì)胞轉(zhuǎn)染SV40大T抗原而建立的永生化細(xì)胞系。因此LX-2保留了肝星狀細(xì)胞信號傳導(dǎo)、神經(jīng)元基因表達(dá)、視黃醇代謝和纖維化形成的關(guān)鍵特性,如表達(dá)βPDGF-R,Ob-RL,DDR2等,是非常適合研究人類肝纖維化的模型。
LX-2呈上皮細(xì)胞樣,多角形,貼壁生長,倍增時(shí)間3-4天。能夠在血清濃度極低(1%FBS)的條件下生長,并具有高轉(zhuǎn)染性,使用TGF-β1可誘導(dǎo)LX-2細(xì)胞轉(zhuǎn)為化肌成纖維細(xì)胞。該細(xì)胞經(jīng)STR鑒定結(jié)果無誤,且支原體檢測陰性。
LX-2細(xì)胞推薦使用DMEM培養(yǎng)基,含10%胎牛血清,在37度、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。LX-2細(xì)胞增速較慢,倍增時(shí)間為3-4天,建議每周2-3次更換新鮮培養(yǎng)基,按1:2至1:4進(jìn)行傳代,室溫胰酶消化1-2分鐘。
總結(jié):
1.上皮細(xì)胞樣,多角形,貼壁生長,可血清濃度極低(1%FBS)的條件下生長并具有高轉(zhuǎn)染性。
2.增速較慢,推薦使用DMEM培養(yǎng)基,TGF-β1可誘導(dǎo)LX-2細(xì)胞轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞。
3.推薦傳代比例1:2至1:4,傳代周期4-5天。
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