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尼康顯微鏡的使用之亮度的調(diào)節(jié)和濾光片的選用
用集光器的孔徑光闌調(diào)節(jié)像的亮度是尼康顯微鏡初學(xué)者zui常犯的錯(cuò)誤之一，關(guān)閉孔徑光闌當(dāng)然會(huì)減少通過(guò)的光量，但是它相應(yīng)地改變了照明的光錐孔徑，并引起分辨力的損失和標(biāo)本上衍射現(xiàn)象的增大，因而會(huì)嚴(yán)重地影響像的質(zhì)量。
奧林巴斯顯微鏡
奧林巴斯顯微鏡
改變像亮度的方法是通過(guò)可變電阻調(diào)節(jié)燈變壓器上的電壓。當(dāng)這種調(diào)節(jié)不能使用時(shí)（例如用簡(jiǎn)單的高壓照明器）或?yàn)榱艘欢ǖ哪康臒舻碾妷罕仨毐３植蛔儠r(shí)（例如在顯微分光光度計(jì)和彩色顯微照相中），像的亮度的zui終變化應(yīng)該使用撼光片來(lái)調(diào)節(jié)。
有經(jīng)驗(yàn)的觀察者在染色標(biāo)本中一般傾向于使用較低的亮度，當(dāng)然，過(guò)低亮度的昏暗像相應(yīng)地會(huì)降低像的清晰度（而不是分辨力），一定的細(xì)徽結(jié)構(gòu)就可能不太清晰。在用單目鏡筒觀察時(shí)，太低亮度的像將會(huì)促使觀察者疲勞并引起頭痛。但是，較暗的像對(duì)于觀察未染色的標(biāo)本是有利的，這種未染色標(biāo)本的反差主要取決于邊界上的衍射，這時(shí)集光器的孔徑光閡應(yīng)該處于比染色標(biāo)本關(guān)閉更小的位置上。
正如在尼康顯微鏡光源中所討論的，常用的低壓鎢燈在光譜的發(fā)射分布中大部分處于較長(zhǎng)的波長(zhǎng)范圍，這些波長(zhǎng)較長(zhǎng)的紅光對(duì)眼睛來(lái)說(shuō)是可見的，但是對(duì)于像的形成卻是沒有多大用處的。這種在可見光譜上缺乏短波部分的光源，可以使用在光的較短波長(zhǎng)區(qū)域具有通透曲線的濾光片進(jìn)行補(bǔ)償。例如，可以使用藍(lán)色濾片，這種被稱為日光濾片的藍(lán)色濾片能夠使低壓鎢燈的光譜曲線變平，它在藍(lán)光部分有較大的通透性，可以得到類似日光照明的效果，但是它得以大量光能的損失為代價(jià)。一種在光譜的550nm周圍的黃綠區(qū)顯示zui大通透性，并且，更加符合人眼視覺敏感曲線的黃綠色濾光片具有非常良好的效果。它把尼康顯微鏡光能的損失保持在一個(gè)可以接受的限度之內(nèi)，可以被用于簡(jiǎn)單類型的照明器中，而且在良好的染色中反差將顯得比使用藍(lán)建光片或*不使用濾光片更大，另外消色差物鏡正好在光譜*在黃綠區(qū)域?qū)η蛎娌铒@示的矯正，因此這種黃綠色濾光片被廣泛地應(yīng)用于尼康顯微鏡顯微觀察和黑白顯微照相。
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