細(xì)胞凍存管的使用步驟介紹

來(lái)源：上海聯(lián)贏生物科技有限公司 2023年02月26日 20:54

凍存管一般用作實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞的低溫保藏。凍存管又名冷凍管，是常用的實(shí)驗(yàn)耗材，多用于生物、醫(yī)藥、食品等行業(yè)。

使用步驟：

⑴ 從細(xì)菌純培養(yǎng)物中挑取新鮮培養(yǎng)物配成大約為3-4麥?zhǔn)媳葷岫鹊木鷳乙航臃N與菌種保存管中。

⑵ 擰緊保存管，來(lái)回顛倒4-5次使細(xì)菌乳化，不能旋搖。

⑶ 把保存管放入冰箱保存（-20℃--70℃）

細(xì)胞凍存后如何復(fù)蘇？

1. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行常規(guī)消毒，紫外照射30 min以上，超凈臺(tái)開(kāi)啟通風(fēng)10 min。

2. 將新鮮培養(yǎng)基置于37℃恒溫水浴鍋中回溫，回溫后噴以70 % 酒精并擦拭，移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。將10 ml左右新鮮培養(yǎng)基移入無(wú)菌細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，備用。

3. 從液氮保存罐中取出凍存管，立即放入40℃水浴中，輕搖冷凍管使其在快速全部融化，以70 % 酒精擦拭凍存管外部，移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。

4. 將細(xì)胞懸液移入已加培養(yǎng)基的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，放CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

5. 待細(xì)胞貼壁后（根據(jù)細(xì)胞種類貼壁時(shí)間不同，一般4小時(shí)左右），棄去含有冷凍保護(hù)劑的培養(yǎng)基，加入新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

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