液相色譜是一類分離與分析技術(shù),其特點(diǎn)是以液體作為流動(dòng)相,固定相可以有多種形式,如紙、薄板和填充床等。在色譜技術(shù)發(fā)展的過程中,為了區(qū)分各種方法,根據(jù)固定相的形式產(chǎn)生了各自的命名,如紙色譜、薄層色譜和柱液相色譜。
經(jīng)典液相色譜的流動(dòng)相是依靠重力緩慢地流過色譜柱,因此固定相的粒度不可能太小(100μm~150μm左右)。分離后的樣品是被分級(jí)收集后再進(jìn)行分析的,使得經(jīng)典液相色譜不僅分離效率低、分析速度慢,而且操作也比較復(fù)雜。直到20世紀(jì)60年代.發(fā)展出粒度小于10μm的高效固定相,并使用了高壓輸液泵和自動(dòng)記錄的檢測(cè)器,克服了經(jīng)典液相色譜的缺點(diǎn),發(fā)展成高效液相色譜,也稱為高壓液相色譜。
液相色譜儀常用的檢測(cè)器主要有紫外-可見光檢測(cè)器,一般人都叫紫外檢測(cè)器;光電二極管陣列檢測(cè)器,一般被叫做二極管檢測(cè)器,或DAD檢測(cè)器或PAD、PDAD檢測(cè)器等;熒光檢測(cè)器;示差折光檢測(cè)器,一般被稱作示差檢測(cè)器;蒸發(fā)光散射檢測(cè)器,常被叫做蒸發(fā)光檢測(cè)器;電噴霧檢測(cè)器。
紫外檢測(cè)器在液相色譜中的應(yīng)用超過了80%,用量很大,這是和紫外檢測(cè)器的優(yōu)良特性分不開的。紫外檢測(cè)器對(duì)溫度、流速、風(fēng)度、濕度、振動(dòng)等的變化相對(duì)不敏感;靈敏度高,一般能達(dá)到10-9g/ml(萘甲醇溶液);能采用洗脫方式檢測(cè);重復(fù)性好,一般都能可知道1%以內(nèi)。
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