藥物傳遞系統(tǒng)DDS：是將脂質(zhì)體、微囊、微球、微乳、納米囊、納米球、外泌體等作為藥物載體將藥物通過不同的給藥方式，直接輸送到病灶部位的一種新型醫(yī)療方式。
將藥物加載到外泌體
  在進行藥物傳遞系統(tǒng)DDS設(shè)計時，其中一個重要的環(huán)節(jié)就是載藥方法。由于外泌體具有生物相容性、穩(wěn)定性和腫瘤靶向性，隨著外泌體技術(shù)研究的不斷發(fā)展 使它們成為有前景的藥物載體。外泌體的構(gòu)建類似于雙膜脂質(zhì)體，并且藥物裝載方法也類似。但在藥物傳遞系統(tǒng)DDS設(shè)計前需要根據(jù)藥物和外泌體特性仔細選擇。
  外泌體可以通過被動或主動方法裝載多種藥物、大分子和其他物質(zhì)（ 圖 3）。被動方法比較簡單，它是基于藥物與外泌體或細胞孵育，并進一步分離含有藥物的釋放外泌體（ 圖 3 I、II）。這種方法通過不同的藥物濃度梯度來實現(xiàn)；因此，在與外泌體孵育期間，物質(zhì)本身也 會遷移到囊泡中。這一過程可以通過施加額外的力來加強，例如搖動或攪拌等.
   被動裝載法的缺點是裝載效率低，輸出藥物濃度低（約 1%）。將藥物與外泌體或其他 DDS 載體一起孵育是一種較常見并 且簡單的方法，尤其適用于疏水性藥物。
    主動加載方法可以實現(xiàn)更高的加載效率，包括超聲處理 (可達~28%)、電穿孔 (~5%) 、擠壓、凍融、pH 梯度 (1.7%) 和結(jié)合方法。具體方法是通過超聲處理和電穿孔在 外泌體膜上穿孔，再分別由聲波或電脈沖介導(dǎo)（ 圖 3 III、IV）。之后，外泌體將通過上述試劑誘導(dǎo)的小膜孔從溶液中加載藥物。這些方法似乎不會改變外泌體膜的特性，但會導(dǎo)致外泌體大小增加。
   主動加載法的另一種方法是通過抗體或點擊化學(xué)將藥物與外泌體結(jié)合?？贵w將通過它們對外泌體結(jié)構(gòu)元素的親和力非共價結(jié)合到外泌體表面（ 圖 3七). 化學(xué)合成將導(dǎo)致藥物通過例如 PEG 或膜蛋白與外泌體共價結(jié)合，并且進一步釋放取決于外泌體降解。這些方法還可以通過將特定受體引入膜來將外泌體靶向所需細胞 。

圖 3. 將藥物裝入外泌體的方法。
( I )—從藥物暴露細胞中釋放的載藥外泌體，
( II )— 藥物與外泌體孵育并攪拌，
( III )—超聲處理，
( IV )—電穿孔，
( V )— 擠出，
( VI )—凍融循環(huán)，
( VII )-藥物與外泌體的化學(xué)綴合。
     以上步驟中提到的方法允許根據(jù)藥物的親水性和親脂性將藥物摻入外泌體或磷脂雙層的內(nèi)部。親水性物質(zhì)將滲透于外泌體的腔內(nèi)，而可溶于脂質(zhì)的物質(zhì)將聚集在外泌體的膜上（ 圖2）。一些研究報告證明，親水性物質(zhì)很容易加載到外泌體中，而親脂性物質(zhì)的加載效率較低。通常，這些物質(zhì)在體外 24 小時內(nèi)從外泌體釋放約 50% 。
   選擇藥物加載方法時需要考慮到對外泌體結(jié)構(gòu)和特性的影響。目前，通過電穿孔的聚集和融合法使用較為普遍。
    實際上，外泌體作為細胞間信號傳遞分子可以遞送多種物質(zhì)，包括化療藥物（紫杉醇、多柔比星和紫杉醇）、RNA 和 DNA等 。另外，近年來還針對細菌（弓形蟲病和沙門氏菌?。⒉《荆ò滩『鸵倚透窝祝?、癌癥（肺癌、胰腺癌、結(jié)腸癌、腦癌和乳腺癌）等進行基于外泌體的疫苗開發(fā)設(shè)計。所以外泌體也常被用作基因編輯工具遞送的工具 ，例如 Cas9. 
給藥途徑
根據(jù)目前的研究，外泌體主要通過靜脈內(nèi)給藥，位置主要為肝臟肺和腦、胃中，只有少數(shù)研究使用另一種給藥方法，即經(jīng)鼻、口服和腹膜內(nèi)給藥。
表 4. 外泌體的藥物、大分子和潛在靶向策略示例。    近些年，外泌體研究領(lǐng)域發(fā)展迅速，來新型外泌體分離技術(shù)實現(xiàn)了從小體積樣品中快速、高效、精確地分離，在外泌體研究也取得了許多重大進展，這些都使外泌體成為納米藥物、基因要等創(chuàng)新藥的遞送工具。外泌體技術(shù)的發(fā)展 對于未來的外泌體的檢測、生物標志物篩選以及癌癥的鑒別等也都具有重要的意義。
     選擇外泌體作為給藥載體的主要優(yōu)勢在于它可以降低藥物濃度，能夠準確到病灶部位有效提高效率并減少藥物的毒副作用。盡管如此，外泌體的載藥效率仍有提升空間。比如：在外泌體研究領(lǐng)域中，由于不同供體細胞分離的外泌體特性也是不同的，需要足夠了解與熟悉各種外泌體的 特性，了解外泌體的長期毒性、免疫原性和安全性這也是外泌體藥物傳遞系統(tǒng)DDS設(shè)計的重點。
           蘇州阿爾法生物專注于生物實驗室儀器和生物試劑、實驗室耗材行業(yè)14年。所提供的納米粒度儀、熒光顯微鏡等廣泛應(yīng)用于細胞外泌體研究領(lǐng)域。另外，提供的實驗室設(shè)備包括發(fā)酵罐、生物反應(yīng)器、細胞培養(yǎng)搖床、恒溫恒濕培養(yǎng)箱、PCR儀、乳酸分析測定儀等也廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)實驗。