黑順片，為毛茛科植物，具有回陽救逆、補(bǔ)火助陽、散寒止痛等功效。它含有多種生物堿，包括次wu頭堿、wu頭堿、新wu頭堿等。wu頭堿對心腦血管病有很強(qiáng)的功效，可以使冠脈擴(kuò)大，加速主動脈的血液流動速率，適當(dāng)服用能推動血液循環(huán)系統(tǒng)，避免冠脈硬化。

黑順片為附子炮制而成，雖然毒性有所下降，但仍具有部分毒性，如使用不當(dāng)或過量，極易導(dǎo)致wu頭堿中毒。因此，有必要采用一種有效且安全的方法對中藥材中的有效成分進(jìn)行含量檢測。目前，我們依據(jù)中國藥典2020版中的要求采用高效液相色譜法對黑順片中的烏斗堿、次wu頭堿及新wu頭堿含量進(jìn)行測定。

色譜條件：

以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；

色譜柱：ASC C18 MG (S-5) 4.6X250

流動相：A:乙腈-四氫呋喃(25:15)

     B:0.1mol/L 醋酸銨溶液（每1000ml 加冰醋酸0.5ml）

梯度洗脫：按照梯度洗脫表進(jìn)行洗脫，檢測波長為235nm。理論板數(shù)按苯甲酰新烏頭原堿峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。

梯度洗脫表

溶液制備:

對照品溶液的制備

   取苯甲酰新烏頭原堿對照品、苯甲酰烏頭原堿對照品、苯甲酰次烏頭原堿對照品適量，精密稱定，加異丙醇-二氯甲烷（1：1）混合溶液制成每1ml各含10μg的混合溶液，即得。

供試品溶液的制備

   取本品粉末（過三號篩）約 2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加氨試液 3ml，精密加入異丙醇-乙酸乙酯（1：1）混合溶液 50ml，稱定重量，超聲處理（功率 300W，頻率 40kHz，水溫在25℃以下）30分鐘，放冷，再稱定重量，用異丙醇-乙酸乙酯（1：1）混合溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液 25ml，40℃以下減壓回收溶劑至干，殘?jiān)芗尤氘惐?/span>-二氯甲烷（1：1）混合溶液 3ml 溶解，濾過，取續(xù)濾液，即得。

   測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各 10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。

本品按干燥品計(jì)算，含苯甲酰新烏頭原堿（C31H43NO10）、苯甲酰烏頭原堿（C32H45NO10） 和苯甲酰次烏頭原堿 （C31H43NO9）的總量，不得少于 0.010%。

用戶實(shí)測

用戶使用色譜柱ASC C18 MG (S-5) 4.6X250進(jìn)行多次分析得出的譜圖。

通過我們的用戶實(shí)測反饋，采用ASC C18 MG (S-5) 4.6X250色譜柱可以實(shí)現(xiàn)黑順片（附子）中wu頭堿、次wu頭堿、新wu頭堿含量的檢測，方法準(zhǔn)確、靈敏度高，可以滿足日常分析檢測的要求。

色譜柱ASC C18 MG (S-5) 4.6X250介紹：

高碳載量，分離能力更強(qiáng)；超純硅膠，金屬雜質(zhì)含量極低，擁有更高的柱效；高比表面積，更高的載樣量，適用于低濃度物質(zhì)分析；自動化裝填，批次重復(fù)性更佳。

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