生物顯微鏡是細(xì)胞研究*的觀察儀器,生物顯微鏡世界多種多樣,下面就講一下不同配置顯微鏡的區(qū)別的優(yōu)缺點(diǎn),幫助您快速選擇符合要求的產(chǎn)品:
按顯微鏡光路大致可以區(qū)分為三類(lèi):
1、正置顯微鏡---觀察切片標(biāo)本、組織;
2、倒置顯微鏡---觀察活細(xì)胞、細(xì)菌、組織培養(yǎng)、懸浮體,沉淀物等;
3、體視顯微鏡(解剖顯微鏡)---大體標(biāo)本。
按顯微鏡觀察方式可以區(qū)分為7種:
1.明場(chǎng)顯微鏡
2.暗場(chǎng)顯微鏡
3.相差顯微鏡
4.偏光顯微鏡
5. 微分干涉顯微鏡(DIC)
6. 浮雕相襯顯微鏡(RC)
7.熒光顯微鏡
下面仔細(xì)介紹常用的幾種觀察方式的特點(diǎn):
(一)明場(chǎng)顯微鏡
常規(guī)觀察方式
應(yīng)用領(lǐng)域:常規(guī)鏡檢、病理、染色標(biāo)本
優(yōu)點(diǎn):視野亮度高、均勻,應(yīng)用范圍廣,操作簡(jiǎn)單,價(jià)格低,
局限:透明標(biāo)本對(duì)比度低,標(biāo)本沒(méi)有立體感
(二)暗場(chǎng)顯微鏡
1 原理:丁道爾(Tyndall)現(xiàn)象,微粒對(duì)斜射光反射或衍射,增大了人眼可見(jiàn)性。
2 特點(diǎn):觀察到極其微小物體,分辨率可達(dá)0.02 ~ 0.004 um (明場(chǎng)0.2um)—”超顯微“。
3 局限:只能觀察到物體存在、運(yùn)動(dòng)和外部形態(tài)、不方便調(diào)節(jié)、標(biāo)本要求高(灰塵、蓋片、載片)
4 應(yīng)用:檢測(cè)微小粒子、細(xì)菌形態(tài)觀察、細(xì)菌記數(shù)CDC 用于檢測(cè)鉤端螺旋體。
(三)相差顯微鏡
1 原理:利用被檢物體的光程(折射率 x 厚度)差進(jìn)行鏡檢,即利用干涉現(xiàn)象,將相位差變?yōu)槿搜劭梢苑直娴恼穹?/p>
2 特點(diǎn):鑒定活體細(xì)胞比較實(shí)用經(jīng)濟(jì)的方法
3 局限:需要光強(qiáng)高、標(biāo)本不能太厚(5~10um)、蓋片、載片需符合標(biāo)準(zhǔn)、每個(gè)物鏡需要對(duì)應(yīng)相應(yīng)的相差環(huán)
4 應(yīng)用:無(wú)色透明活體標(biāo)本的細(xì)微結(jié)構(gòu),檢查,鑒定活體細(xì)胞(培養(yǎng)細(xì)胞,分離細(xì)胞)
(四)偏光顯微鏡
1 原理:依據(jù)波動(dòng)光學(xué)原理觀察和精密測(cè)定標(biāo)本細(xì)節(jié),或透明物體改變光束的物理參數(shù),以此判別物質(zhì)結(jié)構(gòu)的一種顯微鏡
2 應(yīng)用:礦物質(zhì)、化學(xué)物品鑒別、鑒別纖維、染色體、淀粉粒、細(xì)胞中晶體、植物病理檢驗(yàn)、鑒別骨骼、牙齒、膽固醇、神經(jīng)纖維、橫紋肌和毛發(fā)等
(五)微分干涉顯微鏡(DIC)
1 原理:通過(guò)特制的棱鏡將偏振光分解相互垂直,強(qiáng)度相等的光束,光束在極近的兩點(diǎn)(小于顯微鏡的分辨率)上通過(guò)被檢物體,從而在相位上略有差別,使圖象呈現(xiàn)出立體三維感覺(jué)。
2 特點(diǎn):可以使被檢物體產(chǎn)生三維立體感覺(jué),觀察效果更直觀,無(wú)須特殊物鏡,與熒光觀察配合更好,可以調(diào)節(jié)背景和物體的顏色變化而達(dá)到理想的效果。
3 局限:需要光強(qiáng)高、雙折射物質(zhì)不能達(dá)到DIC鏡檢效果、塑料容器培養(yǎng)物的觀察效果一般、鏡檢靈敏度有方向性、調(diào)節(jié)較復(fù)雜
4 應(yīng)用:無(wú)色透明活體標(biāo)本的細(xì)微結(jié)構(gòu),無(wú)色熒光標(biāo)本,染色標(biāo)本,顯微操作等、CDC用于水質(zhì)檢測(cè)(兩蟲(chóng)觀察)、共聚焦常使用DIC觀察法
(六)浮雕相襯顯微鏡
1 原理:斜射光照射到標(biāo)本產(chǎn)生折射、衍射,光線通過(guò)物鏡光密度梯度調(diào)節(jié)器產(chǎn)生不同陰影,從而使透明標(biāo)本表面產(chǎn)生明暗差異,增加觀察對(duì)比度。
2. 特點(diǎn)
提高未染色標(biāo)本的可見(jiàn)性和對(duì)比度;圖象顯示陰影或近似三維結(jié)構(gòu)而不會(huì)產(chǎn)生光暈;可檢測(cè)雙折射物質(zhì)(巖石切片、水晶、骨頭) ;可檢測(cè)玻璃,塑料等培養(yǎng)皿中的細(xì)胞,器官和組織;聚光鏡的工作距離可以設(shè)計(jì)的更長(zhǎng);
RC物鏡也可用于明場(chǎng),暗場(chǎng)和熒光觀察
3. 局限:觀察效果與標(biāo)本方向密切相關(guān)、操作較復(fù)雜、不同物鏡需要匹配不同的光學(xué)部件
4. 應(yīng)用:所有類(lèi)型的細(xì)胞,組織(無(wú)論活體,染色,未染色),晶體表面細(xì)節(jié),透明聚合物,玻璃和其它類(lèi)似材料,尤其適用于顯微操作
(七)熒光顯微鏡
1 優(yōu)點(diǎn):檢出能力高(放大作用)、對(duì)細(xì)胞的刺激?。梢曰铙w染色、轉(zhuǎn)基因、熒光蛋白)、能進(jìn)行多重染色
2 用途:物體構(gòu)造的觀察——熒光素、熒光的有無(wú)、色調(diào)比較進(jìn)行物質(zhì)判別——抗體熒光等、發(fā)熒光量的測(cè)定對(duì)物質(zhì)定性、定量分析
以上就是顯微鏡的大致區(qū)分,希望對(duì)您有幫助,如有選購(gòu)問(wèn)題請(qǐng)聯(lián)系店鋪負(fù)責(zé)人。
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