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我們在使用新的色譜柱應(yīng)該在我們自己的液相色譜儀上進(jìn)行性能測試，即使用色譜柱附帶的檢驗(yàn)報告上測試條件和樣品來測定該色譜柱的柱效。并且，在以后的使用中，應(yīng)時常對色譜柱進(jìn)行測試。高效液相色譜柱在使用的過程中常常有堵塞的現(xiàn)象，造成這種現(xiàn)象的主要原因是：
①溶劑中的不溶物
②樣品中的不溶物
③泵進(jìn)樣器等中的不溶物
④柱內(nèi)不溶物的形成等。
如果當(dāng)色譜柱堵塞以后我們可以對色譜柱進(jìn)行修復(fù)，首先，使用含鹽緩沖液后(如離子對試劑)應(yīng)用溶解性強(qiáng)的溶劑(如水)進(jìn)行沖洗。其次，先斷開檢測器，然后用對來自樣品中的物質(zhì)有強(qiáng)溶解性的溶劑進(jìn)行沖洗，對于反相色譜柱，可使用甲醇、乙睛、四氫呋喃、氯仿、庚烷等，在此條件下，應(yīng)避免溶劑的pH低于2或高于8。
高效液相色譜柱怎樣避免過高的柱壓？
雖然高效液相色譜柱能耐受的壓力可達(dá)6000psi (磅/平方英寸) ,但過高及過大的壓力變化均會縮短色譜柱的壽命,避免的方法是：
(1)柱壓過高時,盡可能采用較小的流速,以不超過柱最大允許壓力的一半為宜。
(2)當(dāng)流速較大時,應(yīng)采取流速梯度的辦法使流速分步到位。
(3)使用手動進(jìn)樣閥時,進(jìn)樣閥的切換要盡可能的快。否則超過20%的壓力沖擊會很快使柱報廢。當(dāng)使用多柱聯(lián)用時,柱切換要避免在高壓下進(jìn)行。
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