免疫沉淀串聯(lián)質(zhì)譜分析(IP-MS)原理介紹:
蛋白質(zhì)相互作用(Protein-Protein Interactions, PPIs)和翻譯后修飾(Post-Translational Modifications, PTMs)的數(shù)據(jù)是能顯著提高基礎(chǔ)類研究文章檔次的內(nèi)容。篩選和發(fā)現(xiàn)目的蛋白(target)在細(xì)胞中新的互作蛋白或者新的后修飾,免疫沉淀(IP,Immunoprecipitation)結(jié)合LC-MS(液相色譜-質(zhì)譜連用,蛋白質(zhì)組學(xué)研究的核心工具)是目前的主流技術(shù)方案(IP-MS)。通過一次IP-MS實(shí)驗(yàn),能高通量的鑒定和篩選到多個(gè)與要研究的目的蛋白(target)存在相互作用的蛋白質(zhì)(蛋白質(zhì)復(fù)合物組分),從而擁有屬于自己的專屬蛋白質(zhì)相互作用數(shù)據(jù)庫,通過深入的生物學(xué)功能與分子機(jī)制的分析,能發(fā)表多篇連續(xù)性的學(xué)術(shù)文章。
免疫沉淀串聯(lián)質(zhì)譜分析(IP-MS)應(yīng)用領(lǐng)域:
免疫沉淀和質(zhì)譜聯(lián)用(IP-MS),可用來確認(rèn)抗體與預(yù)期靶標(biāo)的特異性相互作用。在現(xiàn)有的抗體驗(yàn)證方法中,這種方法的特別之處在于可以主動(dòng)識別和定量純化自樣本的實(shí)際抗體靶標(biāo)。與其他評估抗體特異性的技術(shù)(如,通過對基因敲除小鼠來源樣本進(jìn)行免疫印跡染色,確定某個(gè)消失的條帶)不同,質(zhì)譜法可以直接確定來源于樣本蛋白的肽段序列。因此,IP-MS是確認(rèn)抗體與預(yù)期靶標(biāo)直接結(jié)合的方法。
免疫沉淀串聯(lián)質(zhì)譜分析(IP-MS)整體服務(wù)方案:
客戶只需提供基因名稱和細(xì)胞株即可,我方負(fù)責(zé)完成后續(xù)所有實(shí)驗(yàn),包括:
基因克隆與慢病毒制備。
穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建與鑒定。
細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)。
IP純化蛋白質(zhì)復(fù)合物并SDS-PAGE分離。
切割差異條帶,LC-MS測試分析。
MS數(shù)據(jù)分析,挑選潛在的候選驗(yàn)證蛋白。
購買抗體,進(jìn)行IP結(jié)合Western blot驗(yàn)證。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。