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可見分光光度計是一種結(jié)構(gòu)簡潔、使用方便的單光束分光光度計。其工作原理：物質(zhì)對光的選擇性吸收波長，以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。當(dāng)已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后可用同樣條件將該供試品配成溶液，測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質(zhì)的含量。在可見光區(qū)，除某些物質(zhì)對光有吸收外，很多物質(zhì)本身并沒有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測定,由于顯色時影響呈色深淺的因素較多，且常使用單色光較差的儀器，故測定時應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌吠瑫r操作。
單色光輻射穿過被測物質(zhì)溶液時，被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比，其關(guān)系如下式：
A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc
式中 :A 為吸光度；
I0為入射的單色光強度；
I 為透射的單色光強度；
T 為物質(zhì)的透射率；
k 為摩爾吸收系數(shù)；
L 為被分析物質(zhì)的光程，即比色皿的邊長；
c 為物質(zhì)的濃度。
可見分光光度計對使用環(huán)境的要求：
1、避開陽光直射的場所和有較大氣流流動的場所。
2、請不要安放在有腐蝕性氣體及灰塵多的場所。
3、應(yīng)避開有強烈振動和持續(xù)振動的場所。
4、應(yīng)遠離發(fā)出磁場、電場和高頻電磁波的電氣裝置。
5、儀器應(yīng)放在可載重的穩(wěn)定水平臺面上，儀器背部距墻壁至少15cm以上，以保持有效的通風(fēng)散熱。
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