大家在養(yǎng)細(xì)胞的時候，想必大家也一定遇到過細(xì)胞狀態(tài)差這種情況，但是細(xì)胞狀態(tài)差，有很多種原因造成？

細(xì)胞狀態(tài)很差，常常出現(xiàn)的現(xiàn)象是：細(xì)胞邊緣不清晰、細(xì)胞不飽滿、折光性差、背景比較臟、黑點很多、細(xì)胞碎片多（細(xì)胞凋亡后的細(xì)胞碎片）、單個細(xì)胞內(nèi)有空泡（凋亡）且空泡比較多；如果細(xì)胞出現(xiàn)老化，也就是細(xì)胞比較扁平、增殖減緩、細(xì)胞核體積增大、細(xì)胞突觸變多，此時觀察到的細(xì)胞狀態(tài)也是不正常的。所以，除了考慮血清和細(xì)菌污染的問題，細(xì)胞老化也不容忽視~

首先，我們要知道什么是細(xì)胞老化？

研究表明,衰老細(xì)胞的細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜等均有明顯的變化：
①細(xì)胞內(nèi)水分減少,體積變小,新陳代謝速度減慢；
②細(xì)胞內(nèi)酶的活性降低；
③細(xì)胞內(nèi)的色素會積累；
④細(xì)胞內(nèi)呼吸速度減慢,細(xì)胞核體積增大,核膜內(nèi)折,染色質(zhì)收縮,顏色加深.線粒體數(shù)量減少,體積增大；
⑤細(xì)胞膜通透性功能改變,使物質(zhì)運(yùn)輸功能降低.
形態(tài)變化
總體來說老化細(xì)胞的各種結(jié)構(gòu)呈退行性變化.衰老細(xì)胞的形態(tài)變化表現(xiàn)有：
1、核：增大、染色深、核內(nèi)有包含物
2、染色質(zhì)：凝聚、固縮、碎裂、溶解
3、質(zhì)膜：粘度增加、流動性降低
4、細(xì)胞質(zhì)：色素積聚、空泡形成
5、線粒體：數(shù)目減少、體積增大
6、高爾基體：碎裂
7、尼氏體：消失
8、包含物：糖原減少、脂肪積聚
9、核膜：內(nèi)陷
分子水平的變化
1、DNA：從總體上DNA復(fù)制與轉(zhuǎn)錄在細(xì)胞衰老時均受抑制,但也有個別基因會異常激活,端粒DNA丟失,線粒體DNA特異性缺失,DNA氧化、斷裂、缺失和交聯(lián),甲基化程度降低.
2、 RNA：mRNA和tRNA含量降低.
3、蛋白質(zhì)：含成下降,細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)發(fā)生糖基化、氨甲?；?、脫氨基等修飾反應(yīng),導(dǎo)致蛋白質(zhì)穩(wěn)定性、抗原性,可消化性下降,自由基使蛋白質(zhì)肽斷裂,交聯(lián)而變性.氨基酸由左旋變?yōu)橛倚?
4、 酶分子：活性中心被氧化,金屬離子Ca2+、Zn2+、Mg2+、Fe2+等丟失,酶分子的二級結(jié)構(gòu),溶解度,等電點發(fā)生改變,總的效應(yīng)是酶失活.
5、脂類：不飽和脂肪酸被氧化,引起膜脂之間或與脂蛋白之間交聯(lián),膜的流動性降低.如下圖：

     圖1 HEK293細(xì)胞  

  圖2 MSC細(xì)胞

1. 不要等細(xì)胞長得太滿才傳代。細(xì)胞太密會導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)下降，產(chǎn)生細(xì)胞接觸性抑制。

2. 細(xì)胞不要消化過度。采用胰蛋白酶消化細(xì)胞，會造成細(xì)胞表面一定程度的細(xì)胞損傷。

3. 最重要的是使用優(yōu)質(zhì)的血清和培養(yǎng)基：干細(xì)胞對培養(yǎng)基中的內(nèi)毒素非常敏感。除了要留意基礎(chǔ)培養(yǎng)基的內(nèi)毒素外，也要留意血清的內(nèi)毒素。如果血清中內(nèi)毒素≥3EU/ml時，干細(xì)胞很容易老化或死亡，導(dǎo)致細(xì)胞“亞健康”狀態(tài)，導(dǎo)致實驗受到影響。很多使用者，在血清在試用前，就會通過提早審核該批次《檢測報告》，以決定是否入圍進(jìn)行試用。

4. 在開始養(yǎng)細(xì)胞并傳代時，也要特別注意凍存細(xì)胞，以保持細(xì)胞有種子庫存在，可以有效避免細(xì)胞損傷。

因此應(yīng)挑選內(nèi)毒素低的優(yōu)質(zhì)血清，如進(jìn)口胎牛血清品牌：Ausgenex。

一、血清信息

中文：Ausgenex胎牛血清 FBS500-S

品牌：Ausgenex

規(guī)格：500ml/瓶

貨號：FBS500-S

批號：見瓶身

儲存溫度：-10℃ to -40℃

二、產(chǎn)品描述

本胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)是AusgeneX產(chǎn)品(原產(chǎn)品編號為FBS500-S)，產(chǎn)地澳洲。本胎牛血清不僅適用于常規(guī)的細(xì)胞培養(yǎng)，更適合用于一些要求較高的細(xì)胞的培養(yǎng)。

三、Ausgenex胎牛血清的優(yōu)勢是：