高效液相色譜早期使用隔膜和停流進(jìn)樣器,裝在色譜柱入口處,現(xiàn)在大都使用六通進(jìn)樣閥或自動進(jìn)樣器。進(jìn)樣裝置要求:密封性好,死體積小,重復(fù)性好,保證中心進(jìn)樣,進(jìn)樣時對色譜系統(tǒng)的壓力、流量影響小。
HPLC進(jìn)樣方式可分為:隔膜進(jìn)樣、停流進(jìn)樣、閥進(jìn)樣、自動進(jìn)樣。
1.隔膜進(jìn)樣。用微量注射器將樣品注入專門設(shè)計的與色譜柱相連的進(jìn)樣頭內(nèi),可把樣品直接送到柱頭填充床的中心,死體積幾乎等于零,可以獲得的柱效,且價格便宜,操作方便。但不能在高壓下使用(如10MPA以上);此外隔膜容易吸附樣品產(chǎn)生記憶效應(yīng),使進(jìn)樣重復(fù)性只能達(dá)到1~2%;加之能碉各種溶劑的橡皮不易找到,常規(guī)分析使用受到限制。
2.停流進(jìn)樣。可避免在高壓下進(jìn)樣。但在HPLC中由于隔膜的污染,停泵或重新啟動時往往會出現(xiàn)“鬼峰”,另一缺點是保留時間不準(zhǔn)。在以峰的始末信號控制餾分收集的制備色譜中,效果較好。
3.閥進(jìn)樣。一般HPLC分析常用六通進(jìn)樣閥,其關(guān)鍵部件由圓形密封墊子(轉(zhuǎn)子)和固定底座(定子)組成。由于閥接頭和連接管死體積在存在,柱效率低于隔膜進(jìn)樣(約下降5~10%左右),但耐高壓(35~40MPA),進(jìn)樣量準(zhǔn)確,重復(fù)性好(0.5%),操作方便。
六通閥進(jìn)樣方式有部分裝液法和*裝液法兩種。
?、儆貌糠盅b液法進(jìn)樣時,進(jìn)樣量應(yīng)不大于定量環(huán)體積的50%(多75%),并要求每次進(jìn)樣體積準(zhǔn)確、相同。此法進(jìn)樣的準(zhǔn)確度和重復(fù)性決定于注器取樣的熟練程度,而且易產(chǎn)生由進(jìn)樣引起的峰展寬。
②用*裝液法進(jìn)樣時,進(jìn)樣量應(yīng)不小于定量環(huán)體積的5~10倍(少3倍),這樣才能*置換定量環(huán)內(nèi)和流動相,消除管壁效應(yīng),確保進(jìn)樣的準(zhǔn)確度及重復(fù)性。
六通閥使用和維護(hù)注意事項
?、贅悠啡芤哼M(jìn)樣前必須用0.45UM濾膜過濾,以減少微粒對進(jìn)樣閥的磨損。
?、谵D(zhuǎn)動閥芯時不能太慢,更不能停留在中間位置,否則流動相受阻,使泵內(nèi)壓力劇增,甚至超過泵的大壓力;轉(zhuǎn)到進(jìn)樣位時,過高的壓力將使柱頭損壞。
?、蹫榉乐咕彌_鹽和樣呂殘留在進(jìn)樣閥中,每次分析結(jié)束后應(yīng)沖洗進(jìn)樣閥。通??捎盟疀_洗,或先用能溶解樣品的溶劑沖洗,再用水沖洗。
4.自動進(jìn)樣。用于大量樣品的常規(guī)分析。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。