蛋白可溶性及細(xì)胞定位
HIS。TAG融合蛋白與NI+2的結(jié)合不依賴(lài)于HIS。TAG標(biāo)簽的三級(jí)結(jié)構(gòu),蛋白可以在天然或變性條件下純化。若需確立*純化方法,應(yīng)首*行目的蛋白的細(xì)胞定位,判斷所表達(dá)蛋白是可溶形式還是包涵體,是定位于細(xì)胞質(zhì)還是細(xì)胞周質(zhì)。攜帶有信號(hào)肽序列的外源蛋白可能分泌進(jìn)入細(xì)胞周質(zhì),但這依賴(lài)于宿主菌,信號(hào)肽序列以及重組蛋白本身的性質(zhì)。
注意:在外源蛋白N端構(gòu)建了分泌信號(hào)肽,則HIS。TAG融合標(biāo)簽不能構(gòu)建于N端,因?yàn)樵诳缒みM(jìn)入細(xì)胞周質(zhì)腔是時(shí),HIS。TAG標(biāo)簽可能與信號(hào)肽一起被切掉。
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