熒光光譜儀的歷史
1.原理
在吸收紫外和可見(jiàn)電磁輻射的過(guò)程中,分子受激躍遷至激發(fā)電子態(tài),大多數(shù)分子將通過(guò)與其它分子的碰撞以熱的方式散發(fā)掉這部分能量,部分分子以光的形式放射出這部分能量,放射光的波長(zhǎng)不同于所吸收輻射的波長(zhǎng)。
后一種過(guò)程稱作光致發(fā)光。分子發(fā)光包括熒光、磷光、化學(xué)發(fā)光、生物發(fā)光和散射光譜等?;诨衔锏臒晒鉁y(cè)量而建立起來(lái)的分析方法稱為分子熒光光譜法。
由光源發(fā)出的光通過(guò)切光器使其變成斷續(xù)之光,通過(guò)激發(fā)光單色器變成單色光,此光即為熒光物質(zhì)的激發(fā)光。被測(cè)的熒光物質(zhì)在激發(fā)光照射下所發(fā)出的熒光,經(jīng)過(guò)單色器變成單色熒光后照射于光電倍增管上,由其所發(fā)生的光電流經(jīng)過(guò)放大器放大輸至記錄儀。一個(gè)激發(fā),一個(gè)發(fā)射,采用雙單色器系統(tǒng),可分別測(cè)量激發(fā)光譜和熒光光譜。
2.分類
熒光光譜儀是測(cè)定材料發(fā)光性能的基本設(shè)備。通用熒光光譜儀大致可分為3種:
(1)基本型:在200-800 nm的紫外可見(jiàn)波段的穩(wěn)態(tài)光譜儀。
(2)擴(kuò)展型:覆蓋200-1700 nm波段的紫外可見(jiàn)-近紅外穩(wěn)態(tài)光譜儀。
(3)綜合型:覆蓋上述兩個(gè)波段,同時(shí)可測(cè)瞬態(tài)光譜的光譜儀。
3.主要用途
?。?)熒光激發(fā)光譜和熒光發(fā)射光譜;
?。?)同步熒光(波長(zhǎng)和能量)掃描光譜;
(3)3D(Ex Em Intensity);
?。?)Time Base和CWA(固定波長(zhǎng)單點(diǎn)測(cè)量);
?。?)熒光壽命測(cè)量,包括壽命分辨及時(shí)間分辨;
?。?)計(jì)算機(jī)采集光譜數(shù)據(jù)和處理數(shù)據(jù)(Datamax和Gram32)。
4.發(fā)展歷史
次記錄熒光現(xiàn)象的是16世紀(jì)西班牙的內(nèi)科醫(yī)生和植物學(xué)家N.Monardes,1575年他提到在含有一種稱為“LignumNephriticum”的木頭切片的水溶液中,呈現(xiàn)了極為可愛(ài)的天藍(lán)色。在17世紀(jì),Boyle(1626—1691)和Newton(1624—1727)等科學(xué)家再次觀察到熒光現(xiàn)象。之后熒光就引起了許多科學(xué)家的研究興趣,熒光分析方法也越來(lái)越多的被應(yīng)用到生物和化學(xué)分析當(dāng)中。
當(dāng)然熒光分析方法的發(fā)展,與儀器應(yīng)用的發(fā)展是分不開(kāi)的。總體來(lái)說(shuō),熒光光譜儀自問(wèn)世以來(lái)經(jīng)過(guò)了三個(gè)階段的發(fā)展過(guò)程:
(1)手動(dòng)式;
?。?)自動(dòng)掃描;
?。?)微機(jī)化。
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