抗原修復鍋Antigen Retriever
免疫組織化學方法成功與否關鍵在于抗原決定簇的保存和暴露.組織經甲醛固定.甲醛的醛基與
抗原蛋白的氨基交聯,使決定簇的構像改變.從而影響檢測蛋白表達.要充分暴露抗原決定簇,通
常用到抗原修復鍋。強適于甲醛固定的組織,經石蠟包
埋后進行免疫染色前的處理,配合特別的抗原修復緩沖液確保你得到搞質量的免疫染色效
果。
· 一次可以在6中不同緩沖液中運行,進行抗原暴露
· 僅暴露抗原決定簇,不損傷組織的形態(tài)
· 實驗結果穩(wěn)定,結果重現性高
· 系列的玻片在獨立環(huán)境中經過處理
抗原修復鍋怎樣工作?
看上去,抗原修復鍋似我們烹飪的高壓鍋。這是一款功能*的“高壓鍋”,主要用于抗原暴露
的工作,主要的工作原理也是裝玻片的幾個分室可以達到高溫(>120°C)高壓。靈敏的傳感控制
器來保持一定的溫度和壓力及一定的時間,這些工作參數都是經過嚴格的科學實驗得到的數
據。當達到需要的溫度,抗原修復鍋會在該溫度下保持幾分鐘,之后鍋內玻片被冷卻2個多小
時,特殊設材質的內鍋體控制了鍋和玻片的冷卻速度。
誰是受益人?
研究病理的實驗室,那里需要高質量染色照片(用來發(fā)表)的
缺乏技術人員的實驗室,學生和博士后均可以處理玻片進行組織染色,且不需要很多時間來摸索
小型病理實驗室,每天處理的玻片數量有限
怎樣選擇一種緩沖液(Buffer)
如果你已經知道哪種緩沖液用在微波的某種組織抗原修復,那么用抗原修復鍋時,這種緩沖
液也同時適用的機會很大。我們提供四種即用型緩沖液R-Buffer A/B/C/U,同時也提供同種更加
溫和的組織處理緩沖液,我們稱之G系列,R-Buffer AG/BG/CG/UG。
選擇Buffer,主要考慮以下兩點:
1. 抗原的自然特性以及所選擇的抗體
抗原自身特性和抗原的位置都是首要考慮。我們建議你剛開始的時候選擇抗原表達環(huán)境的
適Buffer。以下是經驗供大家參考:
Most of the nuclear antigens (apoptosis-related, survival-related, proliferation-r
elated) R: Buffer A (or AG).
Cell adhesion molecules, cell membrane antigens (extracellular domain) R: Buffer A (or AG)
Cytoskeleton and cytoskeleton-associated molecules – R:Buffer A (or AG)
Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer B (or BG)
Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer C (or CG)
Most of antibodies raised against a linear peptide – R: Buffer U (or UG)
2. 固定液以及固定程度
建議的組織切片的抗原修復處理是一種針對普通的適化狀態(tài)切片。如果用來切片的組織塊沒有
充分固定,或者過固定(留在福爾馬林溶液中時間過長),或者用了其它的固定液,那么,處
理組織切片的流程方案需要重新修訂,便利的辦法是選擇使用G系列緩沖液。對于過固定的
材料一般推薦用U buffer,或者在同一Buffer里面增加循環(huán)
抗原修復鍋技術參數:
Heigh | 335 mm |
Capacity | 9 litres |
Max. Instrument length | 228 mm |
Width. | 340 mm |
Net Weight | 4.5 kilos |
Internal chamber Dimensions (d/h) | 210/230 mm |
Max. Load Weight | 3.0kg |
Max. Single Fault Temperature | 133.3°C |
使用抗原修復鍋進行染色的效果示例
1.福爾馬林固定,石蠟包埋,人乙狀結腸組織切片,經抗原修復鍋進行抗原暴露,R-
Buffer C (pH 6.0),組織玻片降溫過夜,抗體MIB-1,抗原Ki-67,R-Detect HRP系統染色
2. .福爾馬林固定,石蠟包埋,人乙狀結腸組織切片,經抗原修復鍋進行抗原暴露,R-
Buffer A (pH 8.1),組織玻片降溫過夜,抗體#4B11,抗原CD8 (cell membrane),R-
Detect HRP系統染色.
儀器及配件的選購:
貨號 | 產品名稱 | 規(guī)格 |
62700-20 | Retriever 220 volt (內含3個chamber) | 1 |
62705-01 | Slide Chamber | 3/pk |
62705-02 | Chamber Rack | 1 |
62705-03 | Lifting Device | 1 |
62705-05 | Cord Set (Europe) | 1 |
緩沖液的選購:
貨號 | 產品名稱 | 規(guī)格 |
62706-10 | R-Buffer A (10x) | 250 ml |
62706-11 | R-Buffer B (10x) | 250 ml |
62706-12 | R-Buffer C (10x) | 250 ml |
62706-13 | R-Buffer U (10x) | 250 ml |
62707-10 | R-Buffer AG (2x) | 250 ml |
62707-11 | R-Buffer BG (2x) | 250 ml |
62707-12 | R-Buffer CG (2x) | 250 ml |
62707-13 | R-Buffer UG (2x) | 250 ml |
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