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顯微鏡基礎知識

來源:北京元中銳科集成檢測技術有限公司   2011年01月21日 14:33  

顯微鏡簡史
     
      隨著科學技術的進步,人們越來越需要觀察微觀世界,顯微鏡正是這樣的設備,它突破了人類的視覺極限,使之延伸到肉眼無法看清的細微結
構。

      顯微鏡是從十五世紀開始發(fā)展起來。從簡單的放大鏡的基礎上設計出來的單透鏡顯微鏡,到1847年德國蔡司研制的結構復雜的復式顯微鏡,以
及相差,熒光,偏光,顯微觀察方式的出現(xiàn),使之更廣范地應用于金屬材料,生物學,化工等領域。

顯微鏡的基本光學原理

一. 折射和折射率

      光線在均勻的各向同性介質中,兩點之間以直線傳播,當通過不同密度介質的透明物體時,則發(fā)生折射現(xiàn)像,這是由于光在不同介質的傳播速
度不同造成的。當與透明物面不垂直的光線由空氣射入透明物體(如玻璃)時,光線在其介面改變了方向,并和法線構成折射角。

二. 透鏡的性能

      透鏡是組成顯微鏡光學系統(tǒng)的zui基本的光學元件,物鏡、目鏡及聚光鏡等部件均由單個和多個透鏡組成。依其外形的不同,可分為凸透鏡(正透
鏡)和凹透鏡(負透鏡)兩大類。當一束平行于光軸的光線通過凸透鏡后相交于一點,這個點稱“焦點”,通過交點并垂直光軸的平面,稱“焦平面”。焦點有兩個,在物方空間的焦點,稱“物方焦點”,該處的焦平面,稱“物方焦平面”;反之,在像方空間的焦點,稱“像方焦點”,該處的焦平面,稱“像方焦平面”。

      光線通過凹透鏡后,成正立虛像,而凸透鏡則成正立實像。實像可在屏幕上顯現(xiàn)出來,而虛像不能。

影響成像的關鍵因素—像差

      由于客觀條件,任何光學系統(tǒng)都不能生成理論上理想的像,各種像差的存在影響了成像質量。下面分別簡要介紹各種像差。

      1. 色差(Chromatic aberration)

      色差是透鏡成像的一個嚴重缺陷,發(fā)生在多色光為光源的情況下,單色光不產(chǎn)生色差。白光由紅 橙 黃 綠 青 藍 紫 七種組成,各種光的波長
不同 ,所以在通過透鏡時的折射率也不同,這樣物方一個點,在像方則可能形成一個色斑。光學系統(tǒng)zui主要的功能就是消色差。色差一般有位置色差,放大率色差。位置色差使像在任何位置觀察都帶有色斑或暈環(huán),使像模糊不清。而放大率色差使像帶有彩色邊緣。

      2. 球差(Spherical aberration)

      球差是軸上點的單色相差,是由于透鏡的球形表面造成的。球差造成的結果是,一個點成像后,不在是個亮點,而是一個中間亮邊緣逐漸模糊
的亮斑,從而影響成像質量。
      球差的矯正常利用透鏡組合來消除,由于凸、凹透鏡的球差是相反的,可選配不同材料的凸凹透鏡膠合起來給予消除。舊型號顯微鏡,物鏡的
球差沒有*矯正,應與相應的補償目鏡配合,才能達到糾正效果。一般新型顯微鏡的球差*由物鏡消除。

      3. 慧差(Coma)

      慧差屬軸外點的單色像差。軸外物點以大孔徑光束成像時,發(fā)出的光束通過透鏡后,不再相交一點,則一光點的像便會得到一逗點狀,型如慧
星,故稱“慧差”。

      4. 像散(Astigmatism)

      像散也是影響清晰度的軸外點單色像差。當視場很大時,邊緣上的物點離光軸遠,光束傾斜大,經(jīng)透鏡后則引起像散。像散使原來的物點在成
像后變成兩個分離并且相互垂直的短線,在理想像平面上綜合后,形成一個橢圓形的斑點。像散是通過復雜的透鏡組合來消除。

      5. 場曲(Curvature of field)

      場曲又稱“像場彎曲”。當透鏡存在場曲時,整個光束的交點不與理想像點重合,雖然在每個特定點都能得到清晰的像點,但整個像平面則是
一個曲面。這樣在鏡檢時不能同時看清整個像面,給觀察和照相造成困難。因此研究用顯微鏡的物鏡一般都是平場物鏡,這種物鏡已經(jīng)矯正了場曲。

      6. 畸變(Distortion)

      前面所說各種像差除場曲外,都影響像的清晰度?;兪橇硪环N性質的像差,光束的同心性不受到破壞。因此,不影響像的清晰度,但使像與
原物體比,在形狀上造成失真。

顯微鏡的成像(幾何成像)原理

      顯微鏡之所以能將被檢物體進行放大,是通過透鏡來實現(xiàn)的。單透鏡成像具有像差,嚴重影響成像質量。因此顯微鏡的主要光學部件都由透鏡
組合而成。從透鏡的性能可知,只有凸透鏡才能起放大作用,而凹透鏡不行。顯微鏡的物鏡與目鏡雖都由透鏡組合而成,但相當于一個凸透鏡。為便于了解顯微鏡的放大原理,簡要說明一下凸透鏡的5種成像規(guī)律:

      (1) 當物體位于透鏡物方二倍焦距以外時,則在像方二倍焦距以內、焦點以外形成縮小的倒立實像;
      (2) 當物體位于透鏡物方二倍焦距上時,則在像方二倍焦距上形成同樣大小的倒立實像;
      (3) 當物體位于透鏡物方二倍焦距以內,焦點以外時,則在像方二倍焦距以外形成放大的倒立實像;
      (4) 當物體位于透鏡物方焦點上時,則像方不能成像;
      (5) 當物體位于透鏡物方焦點以內時,則像方也無像的形成,而在透鏡物方的同側比物體遠的位置形成放大的直立虛像。

      顯微鏡的成像原理就是利用上述(3)和(5)的規(guī)律把物體放大的。當物體處在物鏡前F-2F(F為物方焦距)之間,則在物鏡像方的二倍焦距以
外形成放大的倒立實像。在顯微鏡的設計上,將此像落在目鏡的一倍焦距F1之內,使物鏡所放大的*次像(中間像),又被目鏡再一次放大,zui終在目鏡的物方(中間像的同側)、人眼的明視距離(250mm)處形成放大的直立(相對中間像而言)虛像。因此,當我們在鏡檢時,通過目鏡(不另加轉換棱鏡)看到的像于原物體的像,方向相反。

顯微鏡光學系統(tǒng)簡介

      顯微鏡光學系統(tǒng)的設計有三種光學系統(tǒng)。

      1 . 長筒光學系統(tǒng)。
      2 . 無限遠校正光學系統(tǒng):是較*的光路設計,它體現(xiàn)了無限遠校正方式的*性。光線通過物鏡后成為平行光束通過鏡筒,并在結像
透鏡處折射或完成無像差的中間像。物鏡與觀察筒內結像透鏡之間可添加光學附件,而不影響總放大倍數(shù)。另外這種光學系統(tǒng)不需要安裝附加校正透鏡,都能得到*的顯微圖像。
      3. 無限遠雙重色差校正光學系統(tǒng):是目前的光路設計,不但能矯正位置色差,同時還能矯正倍率色差可提高水平分辨率12%,提供
zui高反差、zui高襯度、zui高分辨率的zui銳利圖象。 

 

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