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轉(zhuǎn)染細胞實驗

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更新時間:2022-12-23 13:58:08瀏覽次數(shù):934次

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轉(zhuǎn)染細胞實驗是達為科生物的基礎(chǔ)服務(wù)項目之一,由細胞平臺經(jīng)驗豐富的實驗人員操作完成。

轉(zhuǎn)染(transfection)指真核細胞由于外源DNA摻入而獲得新的遺傳標志的過程。常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可分為兩大類,一類是瞬時轉(zhuǎn)染,一類是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,因此一個宿主細胞中可存在多個拷貝數(shù),產(chǎn)生高水平的表達,但通常只持續(xù)幾天。后者也稱穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,外源DNA既可以整合到宿主染色體中,也可能作為一種游離體(episome)存在。盡管線性DNA比超螺旋DNA轉(zhuǎn)入量低但整合率高。外源DNA整合到染色體中概率很小,大約1/104轉(zhuǎn)染細胞能整合,通常需要通過一些選擇性標記,如來氨丙基轉(zhuǎn)移酶(APH;新霉素抗性基因),潮霉素B磷酸轉(zhuǎn)移酶(HPH),胸苷激酶(TK)等反復(fù)篩選,得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的同源細胞系。

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