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PCR引物合成實驗

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所  在  地上海市

更新時間：2022-12-23 11:38:10瀏覽次數(shù)：1228次

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PCR引物合成實驗：引物合成是通過測定引物的OD值，溶解引物，終合成引物的一個完善的過程。

目前引物合成基本采用固相亞磷酰胺三酯法。亞磷酰胺三酯法合成DNA的片段，具有高效、快速的偶聯(lián)以及起始反應物比較穩(wěn)定的特點。亞磷酰胺三酯法是將DNA固定在固相載體上完成DNA鏈的合成的，合成的方向是由待合成引物的3′端向5′端合成的，相鄰的核苷酸通過3′→5′磷酸二酯鍵連接。

引物合成特點：
1.引物合成的純度高。
2.合成的序列長。
3.合成的效果好。

引物OD數(shù)的定量：
用紫外分光光度計，波長260nm，石英比色杯，光程為1厘米，測定溶液的光密度。測定時溶液的光密度稀釋到0.2-1.0之間。DNA干粉用一定體積的水充分振蕩溶解以后，用1ml水稀釋測OD值。需要根據(jù)稀釋倍數(shù)換算出母液的OD值

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