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細胞凋亡染色實驗

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更新時間:2022-12-22 21:00:56瀏覽次數(shù):811次

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細胞凋亡染色實驗:細胞凋亡(apoptosis)指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定,由基因控制的細胞自主的有序的死亡。

細胞凋亡可以用TNNEL法檢測,TUNEL(TdT-mediated DUTP nick end labeling)細胞凋亡檢測試劑盒是用來檢測組織細胞在凋亡早期過程中細胞核DNA的斷裂情況。其原理是熒光素(fluorescein)標記的dUTP在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT Enzyme)的作用下,可以連接到凋亡細胞中斷裂DNA的3’-OH末端,并與連接辣根過氧化物酶(HRP,horse-radish peroxidase)的熒光素抗體特異性結(jié)合,后者又與HRP第五二氨基聯(lián)苯胺(DAB)反應產(chǎn)生很強的顏色反應(呈深棕色),特異準確地定位正在凋亡的細胞,因而在光學顯微鏡下即可觀察凋亡細胞。由于正常的或正在增值的細胞幾乎沒有DNA斷裂,因而沒有3’-OH形成,很少能夠被染色。TUNEL細胞凋亡試劑盒適用于組織樣本(石蠟包埋、冰凍和超薄切片)和細胞樣本(細胞涂片)在單細胞水平上的凋亡原位檢測。

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