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產(chǎn)品型號(hào)
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2022-12-22 20:30:19瀏覽次數(shù):1044次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)實(shí)時(shí)熒光定量pcr實(shí)驗(yàn)服務(wù)
產(chǎn)地類別 | 國(guó)產(chǎn) | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),綜合 |
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穩(wěn)轉(zhuǎn)株長(zhǎng)用于基因研究方向,便于長(zhǎng)期觀察和檢驗(yàn)基因?qū)τ诩?xì)胞功能以及蛋白的相互作用。
一般轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)方法:
用轉(zhuǎn)染質(zhì)?;虿《厩秩镜姆椒▽?gòu)建好的含靶基因的載體導(dǎo)入細(xì)胞,根據(jù)不同的基因載體中所含的抗性標(biāo)志選用相應(yīng)的試劑進(jìn)行篩選混合陽性克隆。在陽性混合克隆的基礎(chǔ)上,得到單細(xì)胞長(zhǎng)出的陽性單克隆,繼而得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。
一般篩選方法:
1、轉(zhuǎn)染質(zhì)粒后,單克隆方法篩選穩(wěn)定細(xì)胞系
對(duì)大多數(shù)細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率較低。對(duì)于基因過表達(dá),如果轉(zhuǎn)染效率達(dá)到40%,基因過表達(dá)尚可。但是對(duì)于基因干擾實(shí)驗(yàn),對(duì)轉(zhuǎn)染效率要求遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于基因過表達(dá),通常質(zhì)粒轉(zhuǎn)染無法滿足。
另外,質(zhì)粒游離于細(xì)胞質(zhì)中,很快降解,無法滿足較長(zhǎng)時(shí)間的檢測(cè)項(xiàng)目;質(zhì)粒轉(zhuǎn)染整合幾率極低,穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建耗時(shí)耗力,且得率很低,往往需要挑取單克隆株。
2、病毒感染篩選穩(wěn)定細(xì)胞株
病毒感染方法較質(zhì)粒轉(zhuǎn)染篩選單克隆方法更方便和高效,是目前主流的穩(wěn)定細(xì)胞系篩選方法。用慢病毒制備穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株,由于其高效整合、高效轉(zhuǎn)錄、高效表達(dá)、宿主范圍廣,感染效率高,且與細(xì)胞染色體整合而不發(fā)生基因重排,是制備穩(wěn)定細(xì)胞株的理想載體。
服務(wù)內(nèi)容:1、穩(wěn)定:15代以內(nèi)細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)。
2、迅速:一般控制在1個(gè)月以內(nèi)完成構(gòu)建。
3、經(jīng)濟(jì):價(jià)格實(shí)惠。
4、質(zhì)量:對(duì)外源基因進(jìn)行嚴(yán)格鑒定。
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