通過(guò)茜素紅染色檢測(cè)細(xì)胞成骨分化

實(shí)驗(yàn)原理

1、成骨誘導(dǎo)的過(guò)程是使鈣離子能夠以鈣鹽的方式沉淀下來(lái)，“鈣結(jié)節(jié)”，鑒定鈣結(jié)節(jié)的染色方法常用茜素紅染色法。
2、茜素紅：茜素磺酸鈉，茜素S，茜素紅S，茜素胭脂紅，1,2-二羥基蒽醌-3-磺酸鈉，1,2-二羥基蒽醌3-磺酸鈉鹽。橙黃色或黃棕色粉末。易溶于水，微溶于乙醇，不溶于苯。1%水溶液pH為2.15，其水溶液呈前黃褐色，加鹽酸后變?yōu)辄S色，加氫氧化鈉后則變成藍(lán)紫色。有刺激性。能與許多金屬離子生成有色化合物，能與鋯、釷、鋁、鈦及鈣發(fā)生顯色反應(yīng)。

茜素紅染色實(shí)驗(yàn)步驟：

1、石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯I20分鐘，二甲苯Ⅱ20分鐘，無(wú)水乙醇I5分鐘，無(wú)水乙醇Ⅱ5分鐘，75%酒精5分鐘，自來(lái)水洗。

2、茜素紅染色：切片用茜素紅染液染5-10分鐘，自來(lái)水洗，將切片放置烤箱內(nèi)烤干。

3、透明封片：切片入干凈的二甲苯透明5分鐘，中性樹(shù)膠封片。

4、顯微鏡鏡檢，圖像采集分析。

結(jié)果判讀：鈣鹽沉積出呈深紅色，背景淡紅色或者近無(wú)色。